культивирование эмбрионов что это такое

Оплодотворение яйцеклеток и культивирование эмбрионов

Показания для лечения бесплодия помощью ЭКО :

Протокол ЭКО состоит из целого ряда последовательных этапов:

Гаметы (ооциты и сперматозоиды) получают от биологических родителей или из банка доноров. Яйцеклетки извлекают из яичников женщины методом пункции фолликулов в ходе их естественного созревания. Но, как правило, в программах ВРТ используют медикаментозное стимулирование для получения достаточного количества ооцитов. Оплодотворение происходит в лабораторных условиях под контролем специалистов. В некоторых протоколах даже слияние сперматозоида и яйцеклетки контролируется эмбриологом (ICSI). После in vitro оплодотворения зиготы переносят в специальную, обогащенную альбумином, питательную среду для нормального предимплантационного развития эмбрионов. Процесс выращивания эмбриона в условиях in vitro называют культивированием.

В каких условиях культивируют эмбрионы

Ключевым моментом эмбриологического этапа программы ЭКО для предимплантационных эмбрионов человека, развивающихся in vitro, является создание максимально приближенных условий к условиям in vivo.

Эмбрионы культивируются в инкубаторах. Обязательными условиями для in vitro культивирования эмбрионов являются:

В инкубаторе находятся яйцеклетки перед оплодотворением, полученные в результате пункции фолликулов или после разморозки ооцитов. Все процессы, включая оплодотворение, дробление, бластуляция также проходят в условиях инкубатора.

Как долго эмбрионы культивируются в инкубаторе

После оплодотворения культивирование эмбрионов может продолжаться в условиях in vitro до 5-6 дней. Продолжительность зависит от нескольких факторов:

Если получено и оплодотворено небольшое количество яйцеклеток (1-2), то перенос можно проводить на третий день развития эмбрионов. Женщинам, у которых в анамнезе уже есть 1-2 попытки ЭКО и есть достаточное количество эмбрионов, чтобы выбрать лучший эмбрион для переноса в полость матки, рекомендуется подсаживать эмбрионы на пятый день развития. Если предполагается проведение предимплантационного генетического тестирования (ПГТ), то эмбрионы культивируются до 5-6 суток с целью проведения биопсии трофэктодермы на стадии бластоцисты.

Какие среды используются для культивирования эмбрионов

От культуральной среды зависит правильное развитие и продолжительность культитвирования эмбрионов. Чаще всего используют 2 типа сред:

Этапы роста и развития эмбриона в процессе культивации

После оплодотворения зигота проходит ряд изменений, свидетельствующих о правильном развитии:

Дольше 6-7 дней эмбрионы не культивируют, их необходимо либо перенести в полость матки реципиента, либо подвергнуть криоконсервации.

Что такое протокол культивирования эмбрионов

Источник

Культивирование эмбрионов после процедуры ЭКО

Современные лабораторные условия, в которых проводится подращивание, максимально приближены к естественной среде женских репродуктивных органов. В инкубаторах поддерживается определенная температура, влажность и газовый состав воздуха.

Питательные среды насыщаются различными веществами, в том числе, аминокислотами, витаминами и минералами, необходимыми для роста. В Клинике репродукции и генетики EVACLINIC IVF используют двухступенчатые среды, повторяющие изменение условий при прохождении оплодотворенной яйцеклетки по фаллопиевым трубам в матку.

Процесс культивирования проходит согласно стадиям эмбрионального развития по дням. Перенос осуществляется на 3 или 5 сутки после оплодотворения в зависимости от количества полученных эмбрионов – чем их больше, тем дольше выращивание.

1. Через 16-18 часов после контакта яйцеклеток и сперматозоидов оценивают успешность оплодотворения – подсчитывают ооциты с двумя ядрами (женским и мужским). Их и отделяют для дальнейшего выращивания.

2. На 2 сутки происходит полноценное слияние генетического материала с образованием зиготы, которая начинает делиться. Ее клетки теперь называют бластомерами. В это время изучают формы и размеры бластомеров, а также степень фрагментации (объем безъядерных клеток). Чем их больше, тем ниже имплантационный потенциал.

3. На 3 сутки деление продолжается, число бластомеров увеличивается: сначала 4, потом 6 и 8 клеток. Эмбриолог определяет число жизнеспособных зародышей. Если их остается мало, осуществляют перенос.

4. На 4 день эмбрион состоит из 16-18 бластомеров, напоминает тутовую ягоду и называется морулой. Внутри него начинает формироваться полость. Уровень его развития позволяет провести генетическую диагностику и даже определить пол будущего ребенка.

5. К 5 дню полость занимает не менее половины объема морулы, которая теперь носит название бластоцисты. Она имеет наружную часть – трофобласт, которым прикрепляется к эндометрию. Вероятность имплантации значительно увеличивается.

Результаты культивирования заносятся в специальный протокол, где используют буквенно-цифровые обозначения. Степень фрагментации обозначают латинскими буквами A, B, C, D (A – фрагментации нет, D – практически все бластомеры не имеют ядра). Количество клеток оценивают согласно дню развития. Размер бластоцисты, качество трофобласта и внутриклеточной массы отмечают отдельно.

При проведении ЭКО в EVACLINIC IVF квалифицированные эмбриологи ведут тщательный отбор эмбрионов, тщательно следят за поддержанием условий в высокотехнологично оборудованной лаборатории, благодаря чему успешно имплантируются практически все бластоцисты. Узнать об оборудовании, где эмбрионы культивируются, а также о VIP-отеле для Ваших эмбрионов можно в этой статье.

Источник

Культивирование эмбрионов

При успешном нормальном развитии после оплодотворения, в ходе доимплантационной жизни эмбрион должен пройти разные этапы развития

В рамках любой программы ЭКО эмбрион первые 5–7 дней своей жизни растет и развивается вне человеческого организма в искусственных условиях, максимально приближенных к естественным, до момента имплантации эмбриона в матку. Этот период и представляет собой культивирование эмбрионов в искусственной среде, в эмбриологической лаборатории.

Что необходимо для успешного оплодотворения?

Для искусственного оплодотворения необходимо получить яйцеклетки (ооциты) и сперматозоиды, которые будут оплодотворены в искусственных условиях эмбриологической лаборатории. Для успешного оплодотворения клетки должны быть зрелые и хорошего качества. Только зрелые яйцеклетки способны оплодотвориться, так как находятся в нужной стадии клеточного развития (цикла).

Очень важно точное следование назначенному врачом протоколу приема препаратов для получения зрелых яйцеклеток во время пункции. Также зрелость яйцеклеток может зависеть от индивидуальных, в частности генетически обусловленных особенностей репродуктивной системы пациента.

После получения гамет осуществляется их искусственное оплодотворение и культивирование в искусственной питательной среде. Искусственная среда для культивирования эмбрионов важна для успешного эмбриологического этапа. В нашей лаборатории используются сертифицированные среды для культивирования, оптимальные по составу для успешного развития эмбрионов.

Из каких этапов состоит культивирование эмбрионов?

При успешном нормальном развитии после оплодотворения, в ходе доимплантационной жизни эмбрион должен пройти разные этапы развития. В норме на сутки эмбрион образует 4 клетки (бластомера), на 3 сутки — 8 клеток, затем происходит компактизация (слияние клеток), на 4 сутки образуется морула, которая затем на 5 сутки развивается в бластоцисты.

Эмбрион на стадии бластоцисты имеет сферическую форму и состоит из двух типов клеток — внутриклеточная масса и трофэктодерма. Трофэктодерма — наружный слой клеток, из которого впоследствии развивается плацента, а внутриклеточная масса — внутренний слой клеток, из которого затем развивается сам плод.

На каждом этапе доимплантационного развития эмбриона оценивается его качество, чтобы впоследствии выбрать на перенос наиболее перспективный для наступления беременности эмбрион. Качество эмбрионов в нашей лаборатории оценивается на 3 и 5–6 сутки развития. Эти дни наиболее информативны и оценка происходит по общепризнанным классификациям.

На 3 сутки оценивается количество образовавшихся бластомеров (клеток) эмбриона, их форма и размер, наличие или отсутствие фрагментации, степень фрагментации, наличие вакуолей и пр.

Фрагментация эмбриона — что это?

Фрагментация эмбриона — это отделение безъядерных (ануклеарных) фрагментов клеток эмбриона. При оценке качества эмбриона оценивается степень фрагментации выраженная в процентах.

Если фрагментация составляет более 35%, это может говорить о плохом качестве эмбриона, в дальнейшем приводящая к деградации эмбриона и остановке развития. Такой эмбрион не является перспективным для наступления беременности. При оценке качества эмбрионов, все показатели записываются в эмбриологический протокол для того, чтобы впоследствии выбрать наиболее перспективный эмбрион для переноса.

На 5 сутки при благополучном развитии эмбрион образует бластоцисту, состоящую из внутриклеточной массы и трофэктодермы. На данном этапе развития оценивается размер бластоцисты (степень экспансии), а также качество ВКМ и ТЭ, в соответствии с общепринятой классификацией.

Качество эмбрионов зависит от многих факторов. От качества исходно полученных клеток, от эмбриологического этапа, от генетических факторов, от возраста пациентов и особенностей анамнеза пациентов и пр. В случае получения плохих эмбрионов выбирается индивидуальная тактика. Эмбрион плохого качества имеет сниженные шансы на имплантацию и наступление беременности. Перенос такого эмбриона возможен, например, в случае отсутствия альтернативных вариантов.

Перенос эмбрионов осуществляется в свежем или крио цикле. Его можно проводить начиная со вторых суток развития, но оптимально — на 5 сутки, когда эмбрион сформировал бластоцисту. До этого момента есть возможность наблюдать динамику развития эмбрионов, чтобы впоследствии выбрать наиболее хорошо развивавшийся эмбрион и тем самым повысить шансы на беременность. В исключительных случаях перенос эмбриона осуществляется на 3 или 4 сутки.

Стоимость культивирования эмбрионов

Указаны цены на самые востребованные услуги со скидкой 30%, которая действует при оплате наличными или банковской картой. Вы можете обслуживаться по полису ДМС, оплачивать отдельно каждый визит, заключить договор на программу ЭКО или внести депозит. Услуги оказываются на основании заключенного договора.

Принимаются к оплате пластиковые карты MasterCard, VISA, Maestro, МИР. Также доступна бесконтактная оплата картами Apple Pay, Google Pay и Android Pay.

Источник

Оплодотворение яйцеклеток и культивирование эмбрионов

Показания для лечения бесплодия помощью ЭКО :

Протокол ЭКО состоит из целого ряда последовательных этапов:

Гаметы (ооциты и сперматозоиды) получают от биологических родителей или из банка доноров. Яйцеклетки извлекают из яичников женщины методом пункции фолликулов в ходе их естественного созревания. Но, как правило, в программах ВРТ используют медикаментозное стимулирование для получения достаточного количества ооцитов. Оплодотворение происходит в лабораторных условиях под контролем специалистов. В некоторых протоколах даже слияние сперматозоида и яйцеклетки контролируется эмбриологом (ICSI). После in vitro оплодотворения зиготы переносят в специальную, обогащенную альбумином, питательную среду для нормального предимплантационного развития эмбрионов. Процесс выращивания эмбриона в условиях in vitro называют культивированием.

В каких условиях культивируют эмбрионы

Ключевым моментом эмбриологического этапа программы ЭКО для предимплантационных эмбрионов человека, развивающихся in vitro, является создание максимально приближенных условий к условиям in vivo.

Эмбрионы культивируются в инкубаторах. Обязательными условиями для in vitro культивирования эмбрионов являются:

В инкубаторе находятся яйцеклетки перед оплодотворением, полученные в результате пункции фолликулов или после разморозки ооцитов. Все процессы, включая оплодотворение, дробление, бластуляция также проходят в условиях инкубатора.

Как долго эмбрионы культивируются в инкубаторе

После оплодотворения культивирование эмбрионов может продолжаться в условиях in vitro до 5-6 дней. Продолжительность зависит от нескольких факторов:

Если получено и оплодотворено небольшое количество яйцеклеток (1-2), то перенос можно проводить на третий день развития эмбрионов. Женщинам, у которых в анамнезе уже есть 1-2 попытки ЭКО и есть достаточное количество эмбрионов, чтобы выбрать лучший эмбрион для переноса в полость матки, рекомендуется подсаживать эмбрионы на пятый день развития. Если предполагается проведение предимплантационного генетического тестирования (ПГТ), то эмбрионы культивируются до 5-6 суток с целью проведения биопсии трофэктодермы на стадии бластоцисты.

Какие среды используются для культивирования эмбрионов

От культуральной среды зависит правильное развитие и продолжительность культитвирования эмбрионов. Чаще всего используют 2 типа сред:

Этапы роста и развития эмбриона в процессе культивации

После оплодотворения зигота проходит ряд изменений, свидетельствующих о правильном развитии:

Дольше 6-7 дней эмбрионы не культивируют, их необходимо либо перенести в полость матки реципиента, либо подвергнуть криоконсервации.

Что такое протокол культивирования эмбрионов

Источник

Культивирование эмбрионов

Онлайн-консультация

Цены на услугу

Культивирование эмбрионов – процедура, посредством которой осуществляются процессы получения и взращивания эмбрионов в искусственно созданных условиях (не используется женское тело). В ходе этого процесса зародыши снабжаются всем необходимым для полноценного развития и существования. Процесс культивирования в лабораторных условиях длится не более одной полной недели.

Содержание

Как осуществляется процесс культивации эмбрионов?

Первый этап лабораторной процедуры предполагает взятие ооцитов на пункции. Яйцеклетки помещаются в инкубатор, поскольку ооциты должны содержаться при следующих условиях:

В инкубаторе создаются комфортные для жизни и развития условия (как в женском организме). В этом устройстве соблюдается заданный температурный режим, уровень влажности, оптимальный воздушный состав. Внешне агрегат схож с холодильным оборудованием.

Процесс культивирования эмбрионов начинается сразу после того, как яйцеклетка оплодотворится мужским семенем. Как правило, ведущие лаборатории, специализирующиеся на искусственном оплодотворении, проводят процесс культивации эмбрионов в каплях, где поддерживается специализированная культуральная среда. Эти капли расположены в специальных чашках и покрыты слоем минерального масла. Посуда, в которой распложены зародыши, постоянно содержаться в инкубаторных условиях, допускается изъятие всего на несколько минут, в течение которых выполняются необходимые ежедневные манипуляции. Эмбрионы располагаются в каплях. Они крошечны в размерах, их невозможно рассмотреть без специального увеличительного оборудования.

Обеспечение безопасного функционирования инкубатора в лабораторных условиях

Наша лаборатория отличается тем, что весь процесс культивирования выполняется по стандарту САР, разработанным американской коллегией патологов. Такой контроль качества гарантирует максимальную защиту от различных незапланированных и экстремальных ситуаций. Кроме того, специалисты наблюдают не только за эмбрионами, но и контролируют работу самого инкубирующего устройства – они выполняют периодические замеры основных показателей с помощью независимых приборов. Если в ходе измерения показатели температурного режима, уровень влажности или концентрация СО2 превышены или меньше нужного значения, то специалист осуществляет корректировку. Более того, инкубаторные устройства подключаются к сигнализационной системе, то есть при сбое осуществляется оповещение.

Для поддержания в инкубационной камере заданного состава атмосферы к агрегату подключена подача углекислого газа. Всего подключено две линии, которые не зависят друг от друга, подача осуществляется с баллонов. Две линии разработаны для того, чтобы в случаях, когда в одном баллоне заканчивается газ, моментально переключаться на второй источник питания.

Также продумано энергоснабжение, чтобы инкубатор не остался без электричества. Имеется две питающих линии, а также агрегат подключен к источнику бесперебойного питания (ИБП).

Цены на услугу

Что требуется для полноценного развития эмбрионов?

Основное правило – зародышу необходимо создать максимально комфортные условия, схожие с естественными.

Для достижения оптимальных условий применяются:

Какое количество эмбрионов дорастает до стадии бластоциты в процессе культивирования?

Успешность процедуры составляет 40-50%. Доля зрелых клеток после пункции 70-80%. Процедура правильного оплодотворения достигается у 70-80% эмбрионов. В результате на пункции имеет десяток яйцеклеток, при этом среднее число полученных бластоцит к окончанию процедуры равняется двум или трем.

Какие применяются культуральные среды?

Наша клиника применяет среды, прошедшие сертификацию и пригодные для полноценного выращивания эмбрионов. Все полученные материалы проходят контроль на уровень кислотности и осмолярности, кроме того, их тестируют на показатель выживаемости сперматозоидов.

Как вырастить больше бластоцист?

Наша лаборатория использует собственную новейшую методику культивирования, происходящей в звуковой среде, в результате которой создаются особые условия, которые более приближены к физиологическим. Технология основывается на том, что на культуральную чашку воздействуют акустические колебания. В качестве звуковых колебаний применяются звуки в материнском организме, которые записываются с помощью фонендоскопа, также применятся морские звуки, музыка различных жанров, а также речь будущих родителей.

Такой подход к культивированию гарантирует рост вероятности оплодотворения на 6%, при этом количество эмбрионов, сформировавших бластоцисты, увеличивается на 20%.

По каким критериям оценивается качество эмбриологической лаборатории

Чтобы провести полноценную оценку успешности работы лаборатории, необходимо обратить внимание на следующие показатели:

Почему на культивацию эмбрионов уходит 6 дней?

В естественных условиях попадание эмбриона в матку осуществляется на четвертый день развития, по этой причине физиологичнее доращивать эмбрионы до бластоцисты, а после выполнять перенос. Эмбрион на 6-7 день развития начинает искать себе место в матке и после вживается в эндометрий.

Достоинства технологии «Культивирования в звуковой среде» относительно стандартной процедуры

Прежде чем оказаться в матке, эмбриону и соответственной яйцеклетке требуется проделать путь от яичника сквозь маточные трубы до матки. Данная процедура сопровождается движением ресничек в маточной трубе, также происходит передвижение трубной жидкости вокруг эмбриона. Более того, в материнской утробе эмбрион подвергается воздействиям механических и звуковых колебаний. В результате развитие эмбриона происходит в условиях акустических и динамических воздействий.

В лабораторных условиях культивация эмбриона осуществляется в небольших каплях среды, при этом соблюдаются статичные условиях, поскольку материал лежит на полке в инкубаторе, при этом концентрация агентов, которые токсичны и вредны для пациента, увеличивается. Чтобы избавиться от накопленных метаболитов эмбриологи меняют культуральную среду на свежую. Если чаша подвергается вибрационным процессам, то выполняется постоянное перемешивание среды, в результате уменьшается локальная концентрация токсичных метаболитов. Кроме того, вибрационные воздействия влекут за собой изменение внутриклеточного обмена кальция, а также повышается синтез факторов роста.

Наша клиника выполнила исследования на одной тысяче ооцитов, при этом мы предварительно поделили их на две группы:

В ходе исследования было доказано, что вибрационные воздействия положительно сказались на процедуру развития эмбрионов, в результате вырос процент правильного оплодотворения яйцеклетки на 6%, а уровень формирования бластоцист на 20%, что значимо для ЭКО.

Что значит «можно позвонить своим эмбрионам»?

В нашей практике часто встречаются пациенты, которые тяжело переносят разлуку со своими эмбрионами (хотя процесс культивирования длится всего 6 дней). Поэтому мы предлагаем уникальную возможность «общения» со своими эмбрионами посредством мобильной связи. Эта процедура выполняется так, пациент звонит по мобильному в инкубатор, где расположены его эмбрионы. Таким образом, они получают звуковые колебания своих будущих родителей.

Источник