что такое культивирование эмбрионов при эко
Культивирование эмбрионов после процедуры ЭКО
Современные лабораторные условия, в которых проводится подращивание, максимально приближены к естественной среде женских репродуктивных органов. В инкубаторах поддерживается определенная температура, влажность и газовый состав воздуха.
Питательные среды насыщаются различными веществами, в том числе, аминокислотами, витаминами и минералами, необходимыми для роста. В Клинике репродукции и генетики EVACLINIC IVF используют двухступенчатые среды, повторяющие изменение условий при прохождении оплодотворенной яйцеклетки по фаллопиевым трубам в матку.
Процесс культивирования проходит согласно стадиям эмбрионального развития по дням. Перенос осуществляется на 3 или 5 сутки после оплодотворения в зависимости от количества полученных эмбрионов – чем их больше, тем дольше выращивание.
1. Через 16-18 часов после контакта яйцеклеток и сперматозоидов оценивают успешность оплодотворения – подсчитывают ооциты с двумя ядрами (женским и мужским). Их и отделяют для дальнейшего выращивания.
2. На 2 сутки происходит полноценное слияние генетического материала с образованием зиготы, которая начинает делиться. Ее клетки теперь называют бластомерами. В это время изучают формы и размеры бластомеров, а также степень фрагментации (объем безъядерных клеток). Чем их больше, тем ниже имплантационный потенциал.
3. На 3 сутки деление продолжается, число бластомеров увеличивается: сначала 4, потом 6 и 8 клеток. Эмбриолог определяет число жизнеспособных зародышей. Если их остается мало, осуществляют перенос.
4. На 4 день эмбрион состоит из 16-18 бластомеров, напоминает тутовую ягоду и называется морулой. Внутри него начинает формироваться полость. Уровень его развития позволяет провести генетическую диагностику и даже определить пол будущего ребенка.
5. К 5 дню полость занимает не менее половины объема морулы, которая теперь носит название бластоцисты. Она имеет наружную часть – трофобласт, которым прикрепляется к эндометрию. Вероятность имплантации значительно увеличивается.
Результаты культивирования заносятся в специальный протокол, где используют буквенно-цифровые обозначения. Степень фрагментации обозначают латинскими буквами A, B, C, D (A – фрагментации нет, D – практически все бластомеры не имеют ядра). Количество клеток оценивают согласно дню развития. Размер бластоцисты, качество трофобласта и внутриклеточной массы отмечают отдельно.
При проведении ЭКО в EVACLINIC IVF квалифицированные эмбриологи ведут тщательный отбор эмбрионов, тщательно следят за поддержанием условий в высокотехнологично оборудованной лаборатории, благодаря чему успешно имплантируются практически все бластоцисты. Узнать об оборудовании, где эмбрионы культивируются, а также о VIP-отеле для Ваших эмбрионов можно в этой статье.
Культивирование эмбрионов
Культивирование эмбрионов – один из важнейших этапов процедуры ЭКО. Врач – эмбриолог отбирает яйцеклетки и оплодотворяет их подготовленной спермой. После эмбрионы доращивают до стадии бластоцисты и самые жизнеспособные переносят в полость матки.
Культивирование эмбрионов, день первый
В первый день развития у большинства ооцитов появляются первые признаки оплодотворения. К сожалению, не все яйцеклетки годные; в среднем около 10-15% от полученных яйцеклеток незрелые или дегенеративной формы, и являются непригодными к оплодотворению. Через 16-20 часов после инсеминации яйцеклетки наступает стадия презиготы.
Перенос эмбриона в стадии пронуклеусов практикуется крайне редко. Главной причиной является то, что в организме женщины зародыш в данное время должен находиться в маточной трубе, а не в матке. Ну и, конечно, отобрать пригодный эмбрион на данной стадии практически невозможно из-за отсутствия четких общепринятых показателей, а естественная выбраковка ещё не происходит. Однако на стадии пронуклеусов практикуется криконсервирование (замораживание) оплодотворенных яйцеклеток.
Культивирование эмбрионов, день второй
На вторые сутки после оплодотворения яйцеклетки происходит дробление, то есть деление клетки на две, их называют бластомерами. На данной стадии оценивается качество эмбриона, точнее, соотношение в цитоплазме объёмов зародыша и безъядерных фрагментов. Специалисты утверждают, что чем больше ануклеарных (безъядерных) фрагментов, тем ниже потенциал к дальнейшему развитию и, соответственно, к имплантации. Кроме этого, оценивается ещё относительный размер бластомеров и его форма.
На вторые сутки перенос эмбриона в матку практикуют в тех случаях, если оплодотворились одна или две яйцеклетки. Так как пребывание вне организма и вредоносное воздействия в условиях культивирования было минимальным, что благоприятно для эмбриона, его переносят в матку, не дожидаясь стадии бластоцисты.
Культивирование эмбрионов, день третий
В мировой практике ЭКО на протяжении многих лет трансплантировали эмбрионы на 3 сутки из-за несовершенства техники в лабораториях. Когда стало доступно более длительное культивирование, всё более очевидным становилось, что на третьи сутки оценка жизнеспособности является не совсем надёжной.
Культивирование эмбрионов, день четвёртый
На четвертые сутки количество клеток увеличивается до шестнадцати бластомеров. Происходит процесс компактизации: уплотняются межклеточные контакты, сглаживается поверхность эмбриона. Далее наступает стадия морулы. В организме матери именно в этот момент зародыш из маточной трубы попадает в полость матки. Только в конце четвертых суток развития начинается процесс кавитации, когда внутри морулы образуется полость.
Перенос эмбриона в стадии морулы в матку максимально приближён к естественному физиологическому развитию событий, поэтому зачастую даёт замечательные результаты.
Культивирование эмбрионов, пятый и шестой день
На пятый-шестой день развития полость внутри морулы увеличивается и достигает 50% её объёма, с этого момента она называется бластоциста.
Эмбриобласт располагается внутри трофэктодермического пузырька и, собственно, даёт начало телу плода.
Качество бластоцисты оценивается в основном по размеру полости, чем она больше и лучше развит эмбриобласт и трофэктодерма, тем больше потенциал эмбриона к благополучной имплантации. Процесс освобождения (хэтчинга) эмбриона от блестящего слоя происходит после достижения полостью бластоцисты значительных размеров и растяжения, а впоследствии и разрыва блестящей оболочки. Только после хэтчинга бластоциста способна прикрепиться в матке.
Перенос эмбриона на пятые-шестые сутки в современном мире делают чаще всего. По статистике, каждый второй зародыш в стадии бластоцисты успешно имплантируется. Это позволяет переносить всё меньше эмбрионов и тем самым уменьшать риск многоплодия, увеличивая частоту наступления беременности.
С появлением современных технологий культивирование эмбрионов стало возможным в более длительные сроки. Продлённое культивирование в специальных современных средах, отдельных для каждой стадии развития, имитирует микроокружение зародыша. Достигаются прекрасные результаты, бесплодие уже не является приговором.
Культивирование эмбрионов
Онлайн-консультация
Цены на услугу
Культивирование эмбрионов – процедура, посредством которой осуществляются процессы получения и взращивания эмбрионов в искусственно созданных условиях (не используется женское тело). В ходе этого процесса зародыши снабжаются всем необходимым для полноценного развития и существования. Процесс культивирования в лабораторных условиях длится не более одной полной недели.
Содержание
Как осуществляется процесс культивации эмбрионов?
Первый этап лабораторной процедуры предполагает взятие ооцитов на пункции. Яйцеклетки помещаются в инкубатор, поскольку ооциты должны содержаться при следующих условиях:
В инкубаторе создаются комфортные для жизни и развития условия (как в женском организме). В этом устройстве соблюдается заданный температурный режим, уровень влажности, оптимальный воздушный состав. Внешне агрегат схож с холодильным оборудованием.
Процесс культивирования эмбрионов начинается сразу после того, как яйцеклетка оплодотворится мужским семенем. Как правило, ведущие лаборатории, специализирующиеся на искусственном оплодотворении, проводят процесс культивации эмбрионов в каплях, где поддерживается специализированная культуральная среда. Эти капли расположены в специальных чашках и покрыты слоем минерального масла. Посуда, в которой распложены зародыши, постоянно содержаться в инкубаторных условиях, допускается изъятие всего на несколько минут, в течение которых выполняются необходимые ежедневные манипуляции. Эмбрионы располагаются в каплях. Они крошечны в размерах, их невозможно рассмотреть без специального увеличительного оборудования.
Обеспечение безопасного функционирования инкубатора в лабораторных условиях
Наша лаборатория отличается тем, что весь процесс культивирования выполняется по стандарту САР, разработанным американской коллегией патологов. Такой контроль качества гарантирует максимальную защиту от различных незапланированных и экстремальных ситуаций. Кроме того, специалисты наблюдают не только за эмбрионами, но и контролируют работу самого инкубирующего устройства – они выполняют периодические замеры основных показателей с помощью независимых приборов. Если в ходе измерения показатели температурного режима, уровень влажности или концентрация СО2 превышены или меньше нужного значения, то специалист осуществляет корректировку. Более того, инкубаторные устройства подключаются к сигнализационной системе, то есть при сбое осуществляется оповещение.
Для поддержания в инкубационной камере заданного состава атмосферы к агрегату подключена подача углекислого газа. Всего подключено две линии, которые не зависят друг от друга, подача осуществляется с баллонов. Две линии разработаны для того, чтобы в случаях, когда в одном баллоне заканчивается газ, моментально переключаться на второй источник питания.
Также продумано энергоснабжение, чтобы инкубатор не остался без электричества. Имеется две питающих линии, а также агрегат подключен к источнику бесперебойного питания (ИБП).
Цены на услугу
Что требуется для полноценного развития эмбрионов?
Основное правило – зародышу необходимо создать максимально комфортные условия, схожие с естественными.
Для достижения оптимальных условий применяются:
Какое количество эмбрионов дорастает до стадии бластоциты в процессе культивирования?
Успешность процедуры составляет 40-50%. Доля зрелых клеток после пункции 70-80%. Процедура правильного оплодотворения достигается у 70-80% эмбрионов. В результате на пункции имеет десяток яйцеклеток, при этом среднее число полученных бластоцит к окончанию процедуры равняется двум или трем.
Какие применяются культуральные среды?
Наша клиника применяет среды, прошедшие сертификацию и пригодные для полноценного выращивания эмбрионов. Все полученные материалы проходят контроль на уровень кислотности и осмолярности, кроме того, их тестируют на показатель выживаемости сперматозоидов.
Как вырастить больше бластоцист?
Наша лаборатория использует собственную новейшую методику культивирования, происходящей в звуковой среде, в результате которой создаются особые условия, которые более приближены к физиологическим. Технология основывается на том, что на культуральную чашку воздействуют акустические колебания. В качестве звуковых колебаний применяются звуки в материнском организме, которые записываются с помощью фонендоскопа, также применятся морские звуки, музыка различных жанров, а также речь будущих родителей.
Такой подход к культивированию гарантирует рост вероятности оплодотворения на 6%, при этом количество эмбрионов, сформировавших бластоцисты, увеличивается на 20%.
По каким критериям оценивается качество эмбриологической лаборатории
Чтобы провести полноценную оценку успешности работы лаборатории, необходимо обратить внимание на следующие показатели:
Почему на культивацию эмбрионов уходит 6 дней?
В естественных условиях попадание эмбриона в матку осуществляется на четвертый день развития, по этой причине физиологичнее доращивать эмбрионы до бластоцисты, а после выполнять перенос. Эмбрион на 6-7 день развития начинает искать себе место в матке и после вживается в эндометрий.
Достоинства технологии «Культивирования в звуковой среде» относительно стандартной процедуры
Прежде чем оказаться в матке, эмбриону и соответственной яйцеклетке требуется проделать путь от яичника сквозь маточные трубы до матки. Данная процедура сопровождается движением ресничек в маточной трубе, также происходит передвижение трубной жидкости вокруг эмбриона. Более того, в материнской утробе эмбрион подвергается воздействиям механических и звуковых колебаний. В результате развитие эмбриона происходит в условиях акустических и динамических воздействий.
В лабораторных условиях культивация эмбриона осуществляется в небольших каплях среды, при этом соблюдаются статичные условиях, поскольку материал лежит на полке в инкубаторе, при этом концентрация агентов, которые токсичны и вредны для пациента, увеличивается. Чтобы избавиться от накопленных метаболитов эмбриологи меняют культуральную среду на свежую. Если чаша подвергается вибрационным процессам, то выполняется постоянное перемешивание среды, в результате уменьшается локальная концентрация токсичных метаболитов. Кроме того, вибрационные воздействия влекут за собой изменение внутриклеточного обмена кальция, а также повышается синтез факторов роста.
Наша клиника выполнила исследования на одной тысяче ооцитов, при этом мы предварительно поделили их на две группы:
В ходе исследования было доказано, что вибрационные воздействия положительно сказались на процедуру развития эмбрионов, в результате вырос процент правильного оплодотворения яйцеклетки на 6%, а уровень формирования бластоцист на 20%, что значимо для ЭКО.
Что значит «можно позвонить своим эмбрионам»?
В нашей практике часто встречаются пациенты, которые тяжело переносят разлуку со своими эмбрионами (хотя процесс культивирования длится всего 6 дней). Поэтому мы предлагаем уникальную возможность «общения» со своими эмбрионами посредством мобильной связи. Эта процедура выполняется так, пациент звонит по мобильному в инкубатор, где расположены его эмбрионы. Таким образом, они получают звуковые колебания своих будущих родителей.
Оплодотворение яйцеклеток и культивирование эмбрионов
Показания для лечения бесплодия помощью ЭКО :
Протокол ЭКО состоит из целого ряда последовательных этапов:
Гаметы (ооциты и сперматозоиды) получают от биологических родителей или из банка доноров. Яйцеклетки извлекают из яичников женщины методом пункции фолликулов в ходе их естественного созревания. Но, как правило, в программах ВРТ используют медикаментозное стимулирование для получения достаточного количества ооцитов. Оплодотворение происходит в лабораторных условиях под контролем специалистов. В некоторых протоколах даже слияние сперматозоида и яйцеклетки контролируется эмбриологом (ICSI). После in vitro оплодотворения зиготы переносят в специальную, обогащенную альбумином, питательную среду для нормального предимплантационного развития эмбрионов. Процесс выращивания эмбриона в условиях in vitro называют культивированием.
В каких условиях культивируют эмбрионы
Ключевым моментом эмбриологического этапа программы ЭКО для предимплантационных эмбрионов человека, развивающихся in vitro, является создание максимально приближенных условий к условиям in vivo.
Эмбрионы культивируются в инкубаторах. Обязательными условиями для in vitro культивирования эмбрионов являются:
В инкубаторе находятся яйцеклетки перед оплодотворением, полученные в результате пункции фолликулов или после разморозки ооцитов. Все процессы, включая оплодотворение, дробление, бластуляция также проходят в условиях инкубатора.
Как долго эмбрионы культивируются в инкубаторе
После оплодотворения культивирование эмбрионов может продолжаться в условиях in vitro до 5-6 дней. Продолжительность зависит от нескольких факторов:
Если получено и оплодотворено небольшое количество яйцеклеток (1-2), то перенос можно проводить на третий день развития эмбрионов. Женщинам, у которых в анамнезе уже есть 1-2 попытки ЭКО и есть достаточное количество эмбрионов, чтобы выбрать лучший эмбрион для переноса в полость матки, рекомендуется подсаживать эмбрионы на пятый день развития. Если предполагается проведение предимплантационного генетического тестирования (ПГТ), то эмбрионы культивируются до 5-6 суток с целью проведения биопсии трофэктодермы на стадии бластоцисты.
Какие среды используются для культивирования эмбрионов
От культуральной среды зависит правильное развитие и продолжительность культитвирования эмбрионов. Чаще всего используют 2 типа сред:
Этапы роста и развития эмбриона в процессе культивации
После оплодотворения зигота проходит ряд изменений, свидетельствующих о правильном развитии:
Дольше 6-7 дней эмбрионы не культивируют, их необходимо либо перенести в полость матки реципиента, либо подвергнуть криоконсервации.
Что такое протокол культивирования эмбрионов
Культивирование эмбрионов
Об услуге
Культивирование эмбрионов — это процесс получения и выращивания эмбрионов в искусственных условиях вне человеческого организма, в результате которого эмбрионы обеспечиваются всем необходимым для жизни и развития. Максимальное время нахождения эмбриона в лаборатории — 7 дней.
Как культивируют эмбрионы?
Культивирование в условиях лаборатории начинается с момента получения ооцитов на пункции. Ооцитам жизненно важно находиться при температуре 37 0 С и атмосфере с повышенным содержанием СО 2 (около 5-6%), поэтому яйцеклетки сразу помещают в инкубатор.
Инкубатор — это устройство, которое имитирует организм женщины, а именно поддерживает определенную температуру, газовый состав воздушной среды, влажность, внешне он похож на холодильник.
Как обеспечивается безопасная работа инкубаторов в лаборатории?
В нашей лаборатории многоступенчатый контроль качества осуществляется в соответствии с международной организацией Коллегия американских патологов (СAP), что дает высокую степень защиты от непредвиденных ситуаций. Помимо манипуляций с эмбрионами роль эмбриолога — не допустить сбой в работе инкубатора. Эмбриолог каждый день контролирует инкубатор, измеряя независимым прибором концентрацию CO2 и температуру. Если значения выходят из допустимого диапазона, то эмбриолог их корректирует. Каждый инкубатор в нашей лаборатории подключен к общей сигнализации и при сбое оповещает о проблеме.
Для того чтобы поддерживать определенный состав воздушной среды к каждому инкубатору подведен углекислый газ, причем две независимые линии, состоящие из нескольких баллонов газа, которые можно заменять по мере использования. Если в одной линии заканчивается газ, то идет автоматическое переключение на другую линию.
Для работы инкубаторов необходимо бесперебойное питание электроэнергией, поэтому в лабораторию проведено две линии электроснабжения. Если на обеих линиях проблемы, то включается источник бесперебойного питания – генератор.
Что нужно эмбрионам для развития?
Эмбрион должен постоянно находиться в условиях, приближенных к естественным.
В этом ему способствует:
Оптимальные условия для эмбрионов
Записывайтесь на прием к нашим докторам по телефону или отправляйте заявку через форму на этой странице, и мы перезвоним!
Все процессы от забора клеток до переноса эмбриона происходят внутри клиники, мы никому не доверяем ваши эмбрионы, яйцеклетки и сперматозоиды.
Оборудование высшего класса
Лаборатория оснащена самыми современными микроскопами и микроманипуляционными системами, оборудование регулярно обновляется.
Эмбриологи клиники непрерывно повышают свою квалификацию, занимаются научной деятельностью и участвуют в симпозиумах в России и за рубежом.
Стоимость услуг
Принимаются к оплате наличные и пластиковые карты MasterCard, VISA, Maestro, МИР. Также доступна бесконтактная оплата картами Apple Pay, Google Pay и Android Pay.
Услуги
Эмбриологи, которым можно доверять
Ермилова Ирина Юрьевна
Миронова Анна Геннадьевна
Воронич Наталья Сергеевна
Харитонова Маргарита Александровна
Болт Антон Игоревич
Апрышко Валентина Петровна
Кириенко Константин Владимирович
Сколько эмбрионов дорастает до стадии бластоцисты в результате культивирования?
То есть если на пункции у вас получили 10 яйцеклеток, то в среднем количество полученных бластоцист на конец культивирования будет 2-3 бластоцисты.
Какие культуральные среды используются?
В нашей лаборатории используются среды со сертификатами качества, пригодные для работы в эмбриологической лаборатории. Каждая партия среды культуральных сред проверяется на осмолярность и pH, а также проходит тест выживаемости сперматозоидов.
Как оценить качество эмбриологической лаборатории?
Важными показателями успешной работы лаборатории являются:
Почему эмбрионы культивируют 6 дней?
Как можно вырастить больше бластоцист?
Результаты показали увеличение на 6% успеха оплодотворения и на 20% выросло число эмбрионов, сформировавших бластоцисты.
В чем преимущества «культивирования в звуковой среде» перед обычным культивированием?
Чтобы оказаться в матке, эмбрион, а до этого и яйцеклетка, проходят путь от яичника через маточные трубы до матки. Этот процесс сопровождается движением ресничек в маточной трубе и движением трубной жидкости вокруг эмбриона. Также в утробе матери эмбрион подвергается воздействиям звуковых (биение сердца, разговоры матери) и механических колебаний при движении, ходьбе и других процессах повседневной жизнедеятельности. Создается специфическая микрогидродинамическая и акустическая система, в которой идет развитие эмбриона.
В условиях лаборатории эмбрион культивируется в небольших каплях среды в статичных условиях на полке инкубатора, и концентрация токсичных для эмбриона агентов (аммоний и др.), возрастает вблизи эмбриона в процессе культивирования.
В статичной культуральной системе негативный эффект накопления метаболитов решается только заменой культуральной среды на свежую. А при воздействии вибрации происходит постоянное перемешивание среды, и локальная концентрация токсичных метаболитов снижается. Также вибрация вызывает изменение внутриклеточного обмена кальция и увеличение синтеза факторов роста.
Мы провели исследование на 1000 ооцитах, разделив их на две группы. Одна группа культивировалась под воздействием звуковых волн определенной громкости ( не более 80 дцб ) в модифицированном инкубаторе, а вторая — в тишине в обычном инкубаторе. Мы показали, что вибрация от музыки положительно влияет на процесс развития эмбрионов, то есть увеличивается вероятность правильного оплодотворения яйцеклетки ( на 6% ) и процент формирования бластоцист ( на 20% ), что важно для получения беременности.
Что значит «можно позвонить своим эмбрионам»?
Некоторые пациенты психологически тяжело переносят разлуку со своими эмбрионами даже на время культивирования, поэтому для них есть возможность «общаться» с эмбрионами с помощью мобильной связи. Пациенты могут сделать звонок по обычному сотовому телефону в инкубатор на специально выделенный номер, где культивируются их эмбрионы, и передать им звуковые колебания своей речи.
Текст подготовлен заведующей эмбриологической лабораторией, кандидатом биологических наук Апрышко Валентиной Петровной.
У вас есть вопросы? Проконсультируйтесь с нашими опытными врачами и эмбриологами.