Цитологическая лаборатория это что такое

Цитологическая лаборатория это что такое

Цитологическое исследование — это оценка характеристик морфологической структуры клеточных элементов с целью установления диагноза доброкачественной или злокачественной опухоли и неопухолевых поражений. Оно основано на изучении с помощью микроскопа особенностей строения клеток, клеточного состава органов, тканей, жидкостей организма человека в норме и при патологических процессах. Отличие цитологического исследования от гистологического заключается в том, что изучаются не срезы тканей, а клетки.

При распознавании рака в самых начальных стадиях цитологический метод иногда имеет преимущества по сравнению с другими диагностическими тестами. Хорошо известны случаи цитологической диагностики клинически, рентгенологически и эндоскопически «немого» рака желудка, легкого, мочевого пузыря и др.

Наибольшее распространение цитологические исследования получили в области гинекологии, для того, чтобы диагностировать заболевания шейки матки на ранней стадии.

В Лаборатории цитологии НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова выполняются следующие виды цитологических исследований:

Цены на некоторые основные виды исследований:

Исследование цитологических препаратов

Просмотр и консультация врачом готовых цитологических препаратов (до 5 стекол)

Исследование цитологических препаратов на Helicobacter pylori

Исследование цитологических препаратов с помощью жидкостной цитологии

Иммуноцитохимическое исследование материала (1 антитело)

Исследование плоидности ДНК опухоли с помощью анализа микроизображения

можно найти в прайс-листе, воспользовавшись быстрым поиском

Источник

Цитологические исследования. Общая информация

«Цитологическое исследование – исследование, основанное на изучении с помощью микроскопа особенностей строения клеток, клеточного состава органов, тканей, жидкостей организма человека и животных в норме и при патологических процессах. Диагностическое цитологическое исследование сходно с гистологическим исследованием биопсийного материала по цели (прижизненное распознавание патологического процесса), методической основе (морфологический анализ), объекту исследования (компоненты патологических участков органа и ткани), методам окраски ядра, цитоплазмы и других компонентов клетки” (Большая медицинская энциклопедия, 1986).

Цитологическая диагностика зарекомендовала себя как важный метод морфологической верификации диагноза. Она широко используется с целью раннего выявления и лечения предопухолевых процессов и рака, позволяет установить природу различных заболеваний, помочь клиницисту определить тактику лечения больных, осуществить динамическое наблюдение, выявить рецидивы. Цитологическое исследование имеет большое значение в практическом здравоохранении; нередко оно оказывается единственным морфологическим методом, на результате которого основывается лечение.

Организм человека – целостная система, которая состоит более чем из 200 разновидностей клеток, межклеточных пространств, организованных в ткани, органы. В некоторых органах и тканях присутствуют микроорганизмы, а также вирусы, которые способны значительно влиять на работу этих органов и тканей. Это, образно названное Рудольфом Вирховым, клеточное государство содержит около 220 млрд. клеток, каждая из которых предназначена к выполнению определенных функций. Слаженная работа всех морфологических структур регулируется сложными процессами; каждый человек представляет собой индивидуальность, и имеет предрасположенность к определенным заболеваниям, которые могут проявиться или не проявиться в течение жизни. Также индивидуальна реакция разных организмов на различные этиологические агенты, способные вызвать заболевание. Цитологическое исследование позволяет изучить под микроскопом клеточный состав различных органов и тканей, сопоставить найденные изменения с клиническими сведениями и результатами дополнительных исследований (инструментальных, лабораторных, микробиологических, генетических и др.), при необходимости коллегиально оценить полученные данные с целью выработки индивидуального плана лечения больного.

Решающую роль в установлении цитологического диагноза играет получение качественного материала, стандартизация приготовления препаратов, практический опыт врача-цитолога, его интуиция, возможность собрать в одно целое различные признаки (с учетом фона препарата, особенностей клеток и их расположения).

В практической работе цитологическую диагностику отличает простота, быстрота, возможность легко повторить исследование. Области применения цитологической диагностики включают:

Вместе с тем цитологическая диагностика, как все диагностические методы, имеет определенные ограничения, связанные со способом получения материала, качеством приготовления мазка и его окрашивания, локализацией патологического очага, особенностями его гистологического строения. При неудачах цитологического исследования может быть упущена возможность своевременного лечения; ошибочный диагноз может повлечь за собой выполнение неадекватной врачебной тактики, лучевого лечения, химиотерапии, операций большого объема, иногда калечащих пациента. Можно выделить несколько основных аспектов, ограничивающих возможности цитологической диагностики:

Источник

Цитологическая лаборатория это что такое

Задачи цитологической лаборатории

В цитологической лаборатории проводят исследования с целью выявления онкологических заболеваний на ранних стадиях их развития. При локализации очагов в щитовидной железе или шейке матки цитологическая диагностика — один из достоверных методов, который позволяет выявить заболевание.

В основе исследований лежит световая микроскопия клеток и неклеточных компонентов, содержащихся в мазке из материала тканей и органов пациента. Также для цитологического исследования подходят жидкости (мокрота, моча, сок предстательной железы и др.), пунктаты и отпечатки с удалённых тканей.

Материал получает врач, который ведёт больного, — эндоскопист, хирург, гинеколог, онколог, врач УЗИ — и передаёт его в лабораторию.

Цитологическое исследование позволяет выявить злокачественные образования и диагностировать болезнь на ранней стадии. Параллельно диагностируются и фоновые заболевания, которые могут стать причиной развития опухоли.

Однако цитологические исследования проводят не только с целью выявления или опровержения онкологического заболевания, но и при профилактических осмотрах (скринингах), для уточнения неонкологических заболеваний (в том числе и во время оперативного вмешательства), для контроля эффективности лечения (как в ходе терапии, так и по её завершению), а также с целью наблюдения в динамике с целью раннего выявления рецидивов.

Для проведения быстрого, качественного и объективного исследования цитологическая лаборатория должна быть оснащена необходимым оборудованием, инструментами, материалами. Требования регламентированы Приложением №11 к Порядку оказания медицинской помощи населению по профилю «онкология», утверждённому Приказом Министерства здравоохранения РФ от 15.11.2012 г. №915н; Приказом Министерства здравоохранения РФ от 25.12.1997 г. №380 «О состоянии и мерах по совершенствованию лабораторного обеспечения диагностики и лечения пациентов в учреждениях здравоохранения Российской Федерации».

Требования к помещению

Цитологическая лаборатория может работать на базе диагностического отделения онкологического диспансера.

Под неё выделяют несколько помещений, каждое из которых предназначено для выполнения определённого этапа работы: помещение для подготовки материала, рабочий кабинет лаборантов, моечная, помещение для оборудования и хранения образцов, санитарные комнаты.

Также важно и хорошее освещение — оно должно соответствовать санитарным нормам и правилам безопасности работы с летучими веществами.

Штат сотрудников

Цитологической лабораторией заведует врач клинической лабораторной диагностики.

В подчинении у него — врачи-лаборанты, медицинский технолог, лабораторный техник (фельдшер-лаборант), лаборант, санитар (1 сотрудник на 4 врача).

Заведующий отвечает за работу лаборатории и подчинённых сотрудников. Он контролирует своевременную доставку биологических материалов в лабораторию и предоставление результатов анализов врачам.

Врач-лаборант проводит исследования.

Лабораторный техник самостоятельно проводит химические макро- и микроскопические исследования биологического материала крови, желудочного содержимого, спинномозговой жидкости, выпотных жидкостей; исследует отделяемое, а также проводит гельминтно-овоскопическое исследование. Специалист использует методы исследования геморрагического синдрома, технику бактериологических и серологических исследований. Проводит контроль качества выполняемых исследований, обеспечивает точность и надёжность анализов, а также ведёт необходимую учётно-отчётную документацию.

Все сотрудники обязаны строго соблюдать правила техники безопасности и санитарно-гигиенические нормы.

Численность штата зависит от мощности медицинского учреждения и лаборатории, а также от объёма работы в ней.

Согласно Приложению №11 к Порядку оказания медицинской помощи населению по профилю «онкология», утверждённому Приказом Министерства здравоохранения РФ от 15.11.2012 г. №915н, штат формируют из расчёта, что врач-лаборант проводит до 15 исследований в день, а лаборант (фельдшер-лаборант) — до 30.

Оснащение лаборатории

Чтобы цитологическая лаборатория выполняла полный комплекс исследований, необходимо оборудовать её необходимой аппаратурой, расходными материалами, инструментами, посудой.

Требования утверждены в Приказе Министерства здравоохранения РФ №380 от 25.12.1997 г. «О состоянии и мерах по совершенствованию лабораторного обеспечения и лечения пациентов в учреждениях здравоохранения Российской Федерации». Согласно этому приказу, лаборатории нужно автоматизировать (идёт речь о компьютерной обработке полученных в ходе исследований результатов и т. д.), использовать готовые реактивы и биоматериалы.

В этом приказе приведён перечень оборудования, инструментов и материалов, которые обязательно должны быть в цитологической лаборатории.

Необходимое оборудование

В цитологической лаборатории устанавливают микроскоп, вытяжной шкаф, воздушный стерилизатор, лабораторные электронные весы, центрифугу, РН-метр, дистиллятор, аппарат для окраски цитологических образцов, вакуумную сушилку, лабораторную баню, спиртовки, инкубаторы. Дополнительно могут понадобиться наборы для экстренной цитологической окраски, реактивы для РАР-теста (в наборе), реактивы и сыворотки для проведения иммуноцитохимических исследований (в наборе). Также необходимо установить шкаф для хранения стёкол и холодильник для хранения образцов и проб.

Посуда и расходные материалы

Необходимо оснастить цитологическую лабораторию специальной посудой для проведения исследований. В перечень входят различные ёмкости (пробирки, колбы, флаконы, мензурки, чашки Петри, стаканы, банки, колбы), шпатели, пипетки, пинцеты, предметные и покровные стёкла, ножницы.

В лаборатории должны быть и расходные материалы: реактивы, наборы для взятия образцов, вата, марля, средства защиты персонала.

Необходимая мебель

Для оборудования цитологической лаборатории не подходит обычная мебель, например из дерева. Подходит только специальная мебель, разработанная с учётом специфики работы в лабораториях.

Её изготавливают из пластика, металла. Такая мебель прочная, износостойкая, устойчива к коррозии, повреждениям, механическому и химическому воздействию.

Эти материалы обеспечивают высокий уровень санитарии, который так важен в условиях лаборатории. Металлическую и пластиковую мебель можно обрабатывать сильнодействующими дезинфицирующими средствами, и они не повредят её.

В лабораторных помещениях устанавливают лабораторные шкафы и сейфы для хранения реактивов, обустраивают рабочие места (столы и стулья), столы-мойки, вытяжные шкафы, тумбы.

Особое внимание уделяют конструкции мебели – она должна быть эргономичной, удобной и обеспечивать безопасный рабочий процесс.

Источник

Цитологическая лаборатория

В цитологической лаборатории проводят изучение мазков-отпечатков, соскобов, биоптата с целью проведения морфологического исследования и определения характера новообразования (доброкачественное или злокачественное). Анализ на цитологию также используется для оценки формы и структуры клеток, выявления определенных включений, которые могут говорить о прогрессировании патологических процессов и различных заболеваний.

В Поликлинике ЧУЗ «КБ «РЖД-Медицина» им. Н.А. Семашко» функционирует цитологическая лаборатория. Опытные специалисты после получения биоматериала осуществляют морфологическое изучение клеток, что позволяет поставить точный диагноз, определить этиологические факторы и природу болезни. Вы можете обратиться в нашу Поликлинику и пройти комплексное обследование. С пациентами работают квалифицированные врачи высших категорий, а диагностические процедуры организуют специально подготовленные сотрудники. Иногда обследование проводят под контролем ультразвука.

В каких случаях применяется цитологическая диагностика

Направление на цитологию дают различные профильные специалисты, включая хирурга, офтальмолога, гинеколога. Забор материала чаще всего осуществляет врач-эндоскопист. Но процедуру проводят и другие доктора, включая онколога.

Распространенные материалы для проведения цитологии:

Преимуществом данного метода является простота обработки и высокая скорость интерпретации результатов. Изготовление необходимых препаратов не требует получения большого количества биологического материала.

Во время процедуры не используется никакое сложное оборудование. Именно поэтому методика имеет доступную цену для большинства пациентов. Но при этом анализ предоставляет важную диагностическую информацию о конкретном заболевании и позволяет определиться с дальнейшей врачебной тактикой.

Главной задачей данного диагностического метода является определение природы новообразований. Это крайне важно для раннего выявления злокачественных патологий, которые долгое время протекают без явных клинических проявлений. Также профессионалы с помощью этого метода диагностики определяют потенциально опасные фоновые заболевания, которые при длительном течении нередко приводят к росту различных опухолей.

В цитологической лаборатории им Н. А. Семашко квалифицированные специалисты проводят следующие виды анализов:

Цитология активно используется в современной гинекологии. Специалистам крайне важно вовремя выявлять злокачественное поражение половых органов, фоновые заболевания, чтобы на ранней стадии развития оказывать необходимую медицинскую помощь и предупреждать метастазирование обнаруженных злокачественных патологий.

Наша лаборатория оснащена инновационным оборудованием — микроскопами известных производителей Карл Цейс и Олимпус, современными реактивами. Результаты проводимого обследования максимально точные и достоверные. С ними вы можете записаться на прием к любому профессионалу.

Источник

Методы клинической цитологии

Клиническая цитология — признанный полноценный метод морфологического анализа, основанный на изучении и оценке клеточного материала, полученного различными способами из патологического очага.

В практической и исследовательской работе привлекает простота, быстрота, легкая повторяемость. Последнее позволяет использовать цитологический анализ для изучения динамики морфологических изменений в течение заболевания и процессе лечения. Кроме того, цитологическое исследование не требует больших материальных затрат, недороги реактивы и оборудование. Все вышеизложенное позволяет широко использовать метод как для морфологической верификации в условиях поликлиники, так. и для проведения массовых профилактических осмотров, выбора групп риска с последующим систематическим наблюдением за лицами входящими в группы риска.

В нашей стране клиническая цитология является разделом лабораторной диагностики и это находит свое объяснение в том, что традиционно исследование клеточного состава входит в комплекс клинических лабораторных анализов — кровь, костный мозг, экссудаты, отделяемое различных органов.

Вместе с тем, в отличие от классических лабораторных методов, которые, как правило, являются количественными, клиническая цитология носит описательный характер. Последнее сближает цитологию с другим морфологическим методом — гистологией.

В связи с этим необходимо отметить, что в США за последние 50 лет клиническая цитология стала ветвью патологоанатомической диагностики и она вошла в обиход 96% патологоанатомических лабораторий.

Известно, что цитологическая картина отражает гистологическое строение и во многом гистологические критерии подходят для оценки цитологических препаратов. При этом следует напомнить, что при описании результатов цитологического исследования используются диагностические, а не количественные термины.

Таким образом, методологически цитологическое исследование существенно отличается от всех других лабораторных методов.

Мощным стимулом к развитию клинической цитологии послужили разработка и совершенствование установок, приборов и инструментов для диагностического обследования.

Необходимость морфологической верификаций способствовало быстрому и значительному росту числа биопсий, в том числе, и преимущественно, пункционных.

В последние годы диагностическая цитология — наиболее быстро развивающийся раздел патоморфологии. Основным диагностическим направлением клинической цитологии является онкоцитология. В конечном счете цитологический анализ производится в первую очередь для того, чтобы получить ответ на вопрос о наличии злокачественного новообразования. В процессе дифференциальной диагностики определяется характер патологического процесса и устанавливаются воспалительные, реактивные, пролиферативные или предраковые поражения, а также доброкачественные опухоли.

Выбор способа взятия материала определяется характером поражения, локализацией, возможностью проведения инструментальных исследований. Желательно использование в комплексе всех доступных методов взятия материала. В частности, при поражениях мочевого пузыря для цитологического исследования может быть использована нативная моча (эффективность цитологической диагностики 40-45%), спиртовый смыв (эффективность цитологической диагностики 60-65%), мазки-отпечатки с кусочков опухоли, взятых при цистоскопии (эффективность цитологической диагностики около 90%). При комплексном обследовании эффективность цитологической диагностики составляет около 100%

Роль морфологических исследований при диагностике опухолей неуклонно возрастает. Лишь детальная морфологическая характеристика новообразования может полностью удовлетворить клиницистов и дать возможность более обоснованно выбрать метод лечения (хирургическое, лучевое, химиотерапевтическое и их комбинации), поскольку опухоли различного строения, происхождения и степени атипии клеток по разному реагируют на терапию.

Как известно, морфологическая диагностика заболеваний отличается наибольшей достоверностью и многие старые и новые методы лабораторной диагностики, имеющие очень большое значение, особенно в совокупности, не могут исключить морфологические методы исследования из клинической практики. Вместе с тем морфологические исследования в клинике приобретают особую значимость, если анализируются в сопоставлении со всеми данными клиники во всем их объеме.

Чтобы максимально обеспечить интересы клиники, интересы конкретного больного человека, морфологический диагноз должен быть предельно точным и объективно отражающим особенности встретившейся онкоморфологической формы.

В настоящее время вопрос об эффективности цитологической диагностики решается однозначно и ценность этого метода в практической деятельности не вызывает сомнений. Цитологический анализ позволяет оценить характер и степень выраженности пролиферации эпителия, выделяя группу дисплазий и на этой основе формировать группы «повышенного риска». Цитологическое исследование позволяет осуществлять наблюдение непосредственно за характером клеточных изменений эпителия у лиц группы «повышенного риска», что фактически невозможно с помощью других морфологических методов.

Несравненные преимущества перед другими методами имеет цитологическое исследование в выявлении рака начальных стадий. Развитие эндоскопической техники, ультразвуковых методов исследования в немалой степени способствовало широкому внедрению цитологического анализа в диагностике новообразований практически из всех тканей организма, в том числе и из внутренних органов ранее недоступных внеоперационному морфологическому анализу.

При распознавании так называемых «ранних раков», цитологический метод имеет нередко преимущества перед другими способами исследования. Свидетельством этому является цитологическая диагностика случаев рака желудка, легкого, мочевого пузыря и других органов при отсутствии клинических, рентгенологических и эндоскопических проявлений, ещё до появления обнаруживаемых этими методами признаков.

Весь опыт существования и постоянного совершенствования клинической цитологии показывает, что цитологическое исследование позволяет с достаточно высокой достоверностью не только констатировать наличие злокачественного новообразования, но и в большинстве случаев определить гистогенез (происхождение, тканевую принадлежность) и степень дифференцировки опухоли. Последнее весьма важно для клиники, т. к. известно, что чувствительность к различным химио- и лучевым воздействиям во многом определяется степенью дифференцировки новообразования. Кроме того, уровень дифференцировки опухоли может быть использован в качестве довольно значимого прогностического показателя.

Такой высокий уровень диагностики позволяет использовать в работе принятые международные морфологические классификации, что чрезвычайно важно, более того, способствует разработке соответствующих цитологических классификаций. В связи с этим следует отметить, что разработка современных цитологических классификаций в соответствии с общепринятыми является одной из неотложных научных и практических задач клинической цитологии.

В настоящее время успехи в обеспечении здоровья населения во многом зависят от проведения массовых профилактических осмотров и в первую очередь групп с повышенным риском различными заболеваниями, особенно злокачественными новообразованиями.

Проведение эффективных массовых профилактических осмотров, как показывает наш опыт и опыт многих стран, невозможен без использования цитологического метода, получившего полное признание и широкое распространение в последние годы. На современном уровне цитологическое исследование является одним из эффективных методов диагностики на любом этапе прогрессии опухоли и в этом плане дает возможность: показать характер и степень выраженности пролиферации клеток; диагностировать злокачественные опухоли при любой локализации в любой стадии процесса.

Ранняя и своевременная диагностика опухолей организационно складывается из двух этапов:

1. Массовое обследование населения (скрининг всей популяции или только групп повышенного риска) для выявления опухолей или признаков, не позволяющих исключить опухоль.

2. Уточняющая диагностика в отобранных во время скрининга сравнительно небольших группах.

На обоих этапах клинической диагностической цитологии принадлежит важная роль, причем использование этого метода характеризуется рядом особенностей.

На первом этапе к цитологическому исследованию как к скрининг-тесту предъявляются особые требования и прежде всего высокая чувствительность (т. е. высокая частота обнаружения клеток опухоли у больных со злокачественными новообразованиями и низкое число так называемых «ложноотрицательных» результатов) при однократном исследовании материала.

Уже доказано, что цитологическое исследование мазков с шейки матки является высокоэффективным скрининг-тестом по раку этой локализации, ибо примерно в 10 раз повышает выявляемость опухолей, по сравнению с визуальной выявляемостью; при этом значительно увеличивается относительная частота обнаружения рака в ранних и доклинических стадиях процесса.

На втором этапе ранней диагностики опухолей, наряду с необходимостью высокой чувствительности, к цитологическому методу предъявляется требование высокой специфичности. Для цитологического исследования на первом этапе высокая специфичность является менее важным показателем, поскольку результаты скрининга всегда проверяются на втором этапе диагностики.

Исследования, осуществляемые с помощью цитологического метода

1. Цитологическое исследование пункционного материала.

Цитологическое исследование пунктатов, полученных тонкой иглой (тонкоигольная биопсия) из опухолей, опухолеподобных образований уплотнений любой локализации: головы, шеи, молочной, щитовидной железы, лимфатических узлов, костей, мягких тканей конечностей, кожи, легких, средостения, органов брюшной полости и забрюшинного пространства,

2. Цитологическое исследование эксфолиативного материала.

Цитологическое исследование секретов, экскретов, отделяемого и соскобов с поверхности эрозий, язв, ран, свищей, мокроты, промывных вод, экссудатов, транссудатов.

3. Цитологическое исследование эндоскопического материала.

Исследование материала, полученного при бронхоскопии, катетеризации бронхов, эзофаго-, гастро-, дуодено-, лаборо-, ректоромано-, колоно-, цистоскопии и других видов эндоскопического обследования при любой локализации патологического процесса.

4. Цитологическое исследование биопсийного и операционного материала

Цитохимическое исследование материала — в т. ч. на гликоген, липиды, ДНК, РHК, ферменты и др.

Определение полового хроматина в клетках опухоли.

Цитологическое исследование материала, полученного при профилактических осмотрах населения.

Исследования вагинального эпителия и уроцитограмм с целью определения эстрогенной насыщенности организма с подсчетом формулы созревания, КПИ, ЭИ и др.

Организация работы цитологической лаборатории (ЦЛ)

Функциональные обязанности сотрудников ЦЛ.

Заведующий ЦЛ.

Организует и обеспечивает работу отделения, составляет план работы отделения с распределением обязанностей между, сотрудниками.

Организует и контролирует доставку в лабораторию цитологического материала и результатов исследования из прикрепленных лечебно-профилактических учреждений (за доставку цитологического материала несет ответственность главный врач учреждения, которое направляет материал), при наличии централизованной доставки — главный врач базового учреждения.

Организует и контролирует выезды медицинского персонала в прикрепленные лечебно-профилактические учреждения для срочных цитологических исследований, проведения пункций, консультаций сложных случаев, клинико-биопсийных конференций, обследования цитологических лабораторий.

Отбирает случаи, подлежащие разбору на клинико-биопсийных конференциях, вместе с зам. главного врача по лечебной работе, составляет повестку, участвует в организации проведения клинико-биопсийных конференций (консультирует докладчиков, осуществляет предварительное изучение цитологических препаратов, слайдов и др.).

Проводит ежегодный анализ работы ЦЛ и представляет руководству ЛПУ.

Руководит работой по составлению к постоянному пополнению коллекции микропрепаратов, созданию фототеки музея.

Консультирует врачей клинических отделений по вопросам клинической цитологии.

Организует повышение квалификации врачей и лаборантов. С этой целью организует и проводит периодические и тематические конференции, в т. ч. по исследованию цитологического материала; освоение новых цитологических и цитохимических методик; проводит разбор сложных случаев цитологической диагностики.

Обеспечивает готовность работы отделения при поступлений для цитологического исследования инфекционного материала.

Отвечает за своевременное предоставление заявок на необходимые материалы, реактивы, инструментарий, оборудование, контролирует их расход и использование.

Несет ответственность за соблюдение сотрудниками отделения правил безопасности, противопожаpной безопасности, хранения ядовитых веществ.

Врач-цитолог

проводит цитологическое исследование профилактического, диагностического, гормонального, цитогенетического материала; при необходимости производит срочное цитологическое исследование, участвует в совместной работе с эндоскопистом, хирургом, другими специалистами в получении материала, при необходимости самостоятельно осуществляет пункционные биопсии;

оставляет микропрепараты для архива, фотографирования, демонстрации на клинико-биопсийной конференции;

дает указание лаборанту о способах обработки цитологического материала, методиках окраски, количестве цитологических препаратов;

контролирует качество и сроки выполнения работы лаборантов, оказывает им методическую помощь;

в неясных случаях обсуждает препараты с другими врачами отделения и консультирует с зав. ЦЛ;

проводит микроскопическое исследование цитологического материала, описывает микроскопическую картину и устанавливает цитологический диагноз. При установлении диагноза злокачественной опухоли, тяжелой дисплазии эпителия, процессов, требующих гормональной терапии и хирургического вмешательства, проведения лучевой или цитостатической терапии, результат исследования подписывает зав. ЦЛ;

докладывает зав. ЦЛ о всех недочетах в производственной работе;

осуществляет организационно-методическую работу;

ежемесячно отчитывается о проделанной работе.

Старший лаборант

организует, обеспечивает и контролирует работу среднего и младшего персонала лаборатории;

ведет графики, начисляет заработную плату, выписывает хим. реактивы, перевязочный материал и др.;

готовит основные растворы хим. реактивов, осуществляет учет и хранение хим. реактивов;

организует учебу среднего, младшего персонала в лаборатории;

помогает зав. отделением в составлении отчетов и заявок на хим. реактивы и оборудование;

следит за санитарно-эпидемиологическим состоянием лаборатории.

Лаборант (фельдшер-лаборант)

осуществляет микроскопические исследования профилактического и гормонального материала;

оформляет документацию для регистрации цитологического материала;

обрабатывает цитологический материал с применением дополнительных методик;

осуществляет срочное изготовление цитологических препаратов;

оформляет выдачи микропрепаратов из архива;

осуществляет уход за приборами и аппаратурой;

готовит хим. реактивы;

участвует в организационно-методической работе по улучшению качества материала;

ежемесячно отчитывается о проделанной работе.

Доставка, регистрация и маркировка материала

Материал для цитологического исследования должен быть доставлен в лабораторию в ближайшие сроки после получения. (жидкость моча, содержимое кист, промины воды экссудаты, мокрота). Мазки, высушенные на воздухе, могут храниться.

Флаконы с материалом и стекла-мазки должны быть маркированы (указана фамилия больного).

В сопровождающем материал направлении должно быть:

фамилия, имя и отчество, пол и возраст больного;

каким образом и откуда получен материал;

в каком виде направляется (жидкость, стекла-мазки), количество;

краткий анамнез с обязательным указанием на наличие и характер вредных воздействий, предшествующего лечения (в особенности гормонального, лучевого, химиотерапии);

данные других методов исследования (рентген, эндоскопия и др.), при подозрении на системное заболевание (гемобластозы) — анализ крови;

описание status localis;

Способы получения и характер материала для цитологического исследования

Материал для цитологического исследования может быть получен различными способами. Прежде всего это:

а) Эксфолиативная цитология, где анализу подвергаются:

отделяемое различных органов (молочная железу бронхи и др.). Для приготовления препарата капля отделяемого наносится на стекло и готовится мазок. Можно также делать отпечатки с места выделения (сосок молочной железы, выходное отверстие свища). Отделяемое бронхов обычно в виде мокроты собирается в сосуд, приготовление препаратов подробно описано в разделе исследования органов дыхания,

жидкости и содержимое кист получают путем пункции полостей (брюшной, плевральной и др.) и кист. Если материала мало, то он наносится на стёкла и распределяется в виде тонкого мазка. Значительные количества жидкости предварительно центрифугируются и затем мазки готовят из осадка. Таким же образом обрабатывается материал промывных вод,

отпечатки со слизистых и кожных покровов, если это доступно, можно делать непосредственно на стекло. В других случаях мазки готовят из соскобов шпателем, с тампонов.

Для исследования эксфолиативного материала в гинекологии существуют отработанные методики, описание которых — в соответствующем разделе.

б) Пункционная цитология — один из наиболее частых видов исследования в клинической цитологии.

Пункция опухолевых образований производится, как правило, тонкой иглой. Для проведения аспирационной биопсии необходим определенный навык. Кроме того, для получения полноценного материала необходимо соблюдать ряд условий. В частности, игла и шприц для пункции должны быть сухими. Не следует проводить предварительную анестезию (введение новокаина). Для пункции богато васкулизированных образований (щитовидная железа, сосудистые опухоли, кость и др.), необходимо использовать иглу с мандреном, последний извлекается после введения иглы в место, из которых предполагается получить материал. Таким же образом, соблюдая вышеописанные правила и используя специальные приспособления, осуществляют пункции под контролем рентгена, ультразвука или компьютерной томографии.

в) Использование для цитологического исследования мазков-отпечатков с биопсийного и операционного материала значительно повышает эффективность цитологической диагностики. Кроме того, морфологическое заключение может быть получено значительно раньше, чем гистологическое Следует отметить исключительную ценность таких параллельных исследований (цитологических и гистологических) в возможности проведения цитогистологических сопоставлений, что в свою очередь существенно обогащает как один, так и другой метод. Для приготовления препарата необходимо соскоб со среза биоптата или операционного материала распределить тонким мазком на стекле. Отпечатки со среза биоптата или кусочка оперативно удаленной ткани наносятся прикосновением поверхности среза к стеклу. Если отпечатки делают с ткани богатой кровью (печень, селезенка и др.), с поверхности среза необходимо снять кровь на фильтровальную бумагу и лишь затем производить отпечатки на стекло.

г) С развитием эндоскопической техники обязательное цитологическое исследование стало более доступным. В современных эндоскопических приборах имеются специальные приспособления для взятия материала на морфологическое исследование. При эндоскопии могут быть получены в частности;

Выбор способа взятия материала определяется характером поражения, локализацией, возможностью проведения инструментальных исследований. Желательно использование в комплексе всех доступных методов взятия материала. В частности, при поражениях мочевого пузыря для цитологического исследования может быть использована нативная моча (эффективность цитологической диагностики 40-50%), спиртовой смыв (эффективность цитологической диагностики 60-65%), мазки-отпечатки с кусочков опухоли, взятых при цистоскопии (эффективность цитологической диагностики около 90%). При комплексном обследовании эффективность цитологической диагностики составляет около 100%

Цитологическое исследование является обязательным компонентом различных клинических методов обследования и необходимо при гинекологическом осмотре брать мазки с шейки матки и из цервикального канала, при подозрении на патологию тела матки-мазки аспирата.

Эндоскопическое исследование:

а) бронхоскопия — мазки щеточкой, трансбронхиальные пунктаты, мазки из материала щипковых биопсий, промывные воды,

б) гастроскопия — мазки щеточкой, отпечатки с щипковых биопсий,

в) колоноскопия, ректоскопия — мазки с ватного тампона, щеточные мазки, отпечатки с биопсий,

г) цистоскопия — нативная моча, спиртовый смыв, отпечатки, с биопсийных кусочков.

д) ларингоскопия — мазки с участков поражения и отпечатки с кусочков,

е) кожа и слизистые оболочки — мазки соскобов с участков поражения, при опухоли — пункция тонкой иглой.

Мягкие ткани, молочная железа, лимфатические узлы, щитовидная железа — пункция тонкой иглой.

Пункция под контролем ультразвука (щитовидная железа, опухоли шеи, печень, селезенка, почка, матки, яичники, предстательная железа, забрюшинные опухоли).

Цитологическому исследованию обязательно должны подвергаться пунктаты серозных полостей, кист, отделяемое из соскоба молочной железы и др.

Стекла для препаратов должны быть чистые, обезжиренные и сухие.

Приготовление стёкол

1. Стекла тщательно промывают щеткой в теплой мыльной (или с моющим средством) воде.

2. Основательно промывают в проточной теплой воде.

3. Затем кипятят 1—2 часа в воде с добавлением соды (2—3%) или моющего средства.

4. После хорошо ополаскивают в чистой горячей воде и промывают в проточной (1—2 часа).

Обработанные и промытые в воде стекла протирают мягкой тряпкой, держа стекла за края и хранят в смеси Никифорова (равные части 96° спирта и эфира). По мере надобности пинцетом извлекают стекла из смеси Никифорова и протирают сухой тряпкой. Обработанные таким образом стекла могут быть использованы для приготовления цитологических препаратов.

Для проведения цитохимических исследований очень хорошие результаты дает обработка предметных стекол и других стеклянных предметов в хромовой смеси следующего состава:

Двухромовокислый калий (бихромат калия) — 100 г

Вода горячая — 1000 мл

Неочищенная серная кислота — 100 мл

Для приготовления этой смеси растворяют в горячей воде двухромовокислый калий, затем охлаждают раствор и после этого добавляют серную кислоту. Кислоту льют осторожно (обязательно в вытяжном шкафу), при этом смесь весьма сильно нагревается и приобретает темно-коричневый цвет. В этом составе предметные стекла и другую стеклянную посуду выдерживают 2—3 дня, а после промывают в проточной воде в течение 1—2 дней.

На хорошо обезжиренном предметном стекле вода должна растекаться тонким слоем, а не собираться в капли.

Для обеспечения надежной маркировки стекол используют механический и химический способы «матирования» края поверхности стекла. Механический способ основан на обработке предметного стекла абразивным камнем на станке. При использовании второго способа в пластмассовый сосуд вместимостью около 300 мл помещают 50 г фторида аммония и 50 мл концентрированной соляной кислоты. Смесь тщательно перемешивают до кашицеобразной консистенции (в вытяжном шкафу). Высота слоя смеси в сосуде не должна превышать 1,5 см. Чистые предметные стекла устанавливают вдоль стенок сосуда таким образом, чтобы один конец стекла был погружен в смесь. В сосуде последовательно размещают 20 — 25 предметных стекол. Через 1 мин стекла переносят на 10—15 мин в пластмассовое ведро с большим количеством воды. Затем воду сливают и стекла обрабатывают слабым раствором серной кислоты (5 мл концентрированной кислоты на 8—10 л воды) для их обезжиривания. После этого стекла тщательно промывают водой и просушивают (можно с помощью вентилятора). Всю работу по подготовке предметных стёкол выполняют в резиновых перчатках. Смесь фторида аммония и концентрированной соляной кислоты можно использовать многократно, добавляя небольшое количество кислоты. Маркировать стекла можно также, подписывая один край стекла тушью.

Фиксация

Если это специально не оговорено методикой, то, как правило, фиксируют высушенные мазки. Лучшим фиксатором для цитологических препаратов является метанол. В метаноле фиксацию проводят от трех до десяти минут.

Кроме того, для фиксации может быть использован этиловый спирт 100°. Время фиксации составляет 10—30 минут.

В качестве фиксатора может использоваться смесь Никифорова (время фиксации минимум 15 минут, максимум 1—2 часа). Некоторые красители (Лейшман, Май-Грюнвальд) являются одновременно фиксаторами.

Для приготовления абсолютного спирта в лабораторных условиях используются прокаленный (безводный) медный купорос.

Приготовление безводного купороса. Берут химически чистый синий купорос (если он крупнокристаллический, то его предварительно толкут в фарфоровой ступке) и прокаливают в фарфоровой чашке. В результате прокаливания происходит удаление кристаллизационной воды из молекулы медного купороса (CuSO₄*5H₂O) и получается безводный купорос белого цвета (CuSO₄). При соприкосновении с водой такой безводный купорос вновь жадно поглощает воду и дает первоначальное соединение синего цвета, на чем и основано его применение для обезвоживания спирта.

Прокаливание ведут с соблюдением известных предосторожностей, а именно: мелко размельченный купорос небольшими порциями прокаливают на малом огне через асбестовую сетку в фарфоровой чашке (или медной посуде) при постоянном помешивании фарфоровой или стеклянной лопаткой. Нельзя пользоваться металлическим шпателем и вести прокаливание в железной или никелированной посуде. Несоблюдение указанных правил может повести к пережиганию, точнее, к разложению медного купороса с образованием окислов меди (CuO). Последнее обстоятельство весьма неблагоприятно сказывается на способности купороса поглощать воду.

Хорошо и осторожно прокаленный медный купорос должен быть совершенно белым или слегка голубоватым: при перекаливании он приобретает серый цвет. Пережженный купорос при соединении с водой дает грязно-зеленые тона, что является нежелательным, ибо затрудняет контроль за ходом обезвоживания спирта. Очень хорошо вести прокаливание купороса на электрической плитке малой мощности или даже в термостате при температуре 60—70°; в этом последнем случае мелко растолченный купорос рассыпают тонким слоем на картоне. Прокаливание в термостате при 60—70° идет медленно, около 3 недель (при ежедневном перемешивании), а при температуре 100° — в течение 1—2 дней (в фарфоровой чашке).

При прокаливании медный купорос начинает отдавать кристаллизационную воду уже при температуре 60°, а при 100° частично разлагается и становится серым.

Прокаленный купорос хранят в банке с притертой пробкой.

Приготовление абсолютного спирта. Для приготовления абсолютного спирта прокаленный белый купорос насыпают в большую широкогорлую банку и заливают 90° спиртом из такого расчета, чтобы столб спирта над купоросом превышал толщину слоя последнего не больше чем в 4—5 раз. Содержимое банки ежедневно взбалтывают в течение 4—5 дней, добиваясь посинения всей толщи оседающего купороса. После этого в банку подсыпают еще порцию белого купороса, но уже в меньшем количестве, примерно в 2—3 раза, и оставляют на 1—2 дня. Подсыпание купороса повторяют до тех пор, пока последняя порция его не перестанет синеть, тогда абсолютный спирт считается готовым. Такой абсолютный спирт хранится постоянно на медном купоросе и используется по мере надобности для различных целей.

Если обезвоживанию подвергается 95—96° спирт, то (прокаленный) купорос приходится добавлять не больше 1—2 раз, и выход абсолютного спирта в этом случае будет составлять около 60—70%. Относительно небольшой выход абсолютного спирта объясняется тем, что значительная часть его остается на купоросе

Техника приготовления мазков

Полученное количество материала не всегда определяет возможности диагностики, иногда очень малое количество материала является достаточным для постановки диагноза. Наличие большого количества крови часто является помехой. При её наличии мазки необходимо делать как можно скорее, иначе наступает свертывание и из свернувшегося сгустка очень трудно сделать мазки и провести исследование. Материал наносят на стекло и очень аккуратно делают мазки, т. к. клетки очень ранимы, а наличие большого количества разрушенных клеток мешает правильной диагностике.

Из жидких пунктатов мазки готовят подобно мазкам крови, если полученная масса плотная или комковатая, то помимо мазков можно приготовить и отпечатки на стекле.

Метод отпечатков имеет определенные преимущества.

Во-первых клетки подвергаются гораздо меньшему травматизму.

Во-вторых есть возможность расположения клеток пластами, что помогает при описании цитологического препарата характеризовать и соотношение клеток между собой.

В-третьих, если материал богат кровью, его необходимо нанести на стекло и тогда выбирать оттуда «белые крупинки» и ими делать мазки.

Метод отпечатков применим при использовании цитологического метода во время операционного вмешательства, а так же получении биопсии. Этот метод может быть использован как самостоятельно, так и параллельно с гистологическим анализом.

В этих случаях помимо пункций проводят получение отпечатков с удаленных или обнаженных органов, с помощью прикосновения стекла предметного к исследуемой ткани. Так же можно готовить препараты при получении материала методом соскоба.

Жидкости, полученные при пункции, тут же центрифугируют, далее сливают верхний слой из центрифуги, а из осадка делают мазки, которые и подвергают цитологическому исследованию. В некоторых случаях приготовленные препараты можно просмотреть под микроскопом, однако диагностику патологии необходимо проводить только по окрашенному препарату.

Источник