Что такое микрореакция преципитации с кардиолипиновым антигеном

Тест выявляет антитела против кардиолипина (липида, который входит в состав мембраны митохондрий и бактерий). Эти антитела присутствуют в крови у больных сифилисом.

Неспецифический антифосфолипидный (реагиновый) тест, современный аналог реакции Вассермана (RW).

Nontreponemal test, rapid plasma reagin test, syphilis screening test, STS.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Общая информация об исследовании

Возбудителем сифилиса является Treponema pallidum (бледная трепонема), бактерия из семейства спирохет.

Сифилис – венерическое заболевание: наиболее часто он передается половым путем. Кроме того, возможно заражение через кровь (например, при совместном использовании шприцев, бритв и пр.), плода от матери или бытовым путем (очень редко).

В международной классификации болезней выделяют врождённый, ранний и поздний сифилис, а также неуточненные формы. В медицинской литературе используются понятия первичный, вторичный и третичный сифилис.

Инкубационный период начинается с момента заражения и длится до первых симптомов (твердого шанкра) в среднем 21 день (от 10 до 90 дней).

Первичный сифилис – стадия с возникновения твердого шанкра до появления сыпи. Твердый шанкр – это язвочка, которая может появляться в том месте, где возбудитель проник в организм (обычно на половых органах). Он не болит и исчезает (без лечения) через 2-6 недель. Также на этой же стадии иногда увеличиваются лимфоузлы. В первое время заболевший человек остается серонегативным (т. е. в его крови еще нет антител против сифилиса).

Вторичный сифилис. Примерно через 4-8 недель после появления шанкра проявляются новые симптомы: сыпь и общее недомогание, температура, головная боль и др. Возможны и более тяжелые проявления.

Затем признаки сифилиса исчезают и заболевание переходит в латентную фазу. При этом возбудитель все же не покидает организм, поэтому при ослаблении иммунитета могут возникать рецидивы болезни. Их симптомы совпадают с проявлениями вторичного сифилиса.

Бывает, что сифилис так и остается в латентной форме. Но в ряде случаев, если человек не лечится, с годами развивается третичный сифилис. При этом поражаются различные органы и ткани: нервная и сердечно-сосудистая система, кости, суставы и др.

Для диагностики сифилиса часто используют серологические тесты (основанные на выявлении антител). Все виды анализов можно разделить на две группы: трепонемные и нетрепонемные тесты. Анализ на сифилис RPR относится к нетрепонемным.

Трепонемные тесты выявляют антитела, направленные конкретно против самих бактерий T. Pallidum, например сифилис РПГА (реакция пассивной гемагглютинации) или сифилис РИФ (реакция иммунофлуоресценции).

Посредством нетрепонемных тестов выявляют антитела против кардиолипина (липида, который входит в состав мембраны митохондрий и бактерий). Они появляются в организме человека со стадии первичного сифилиса (примерно через неделю после возникновения твердого шанкра). При нетрепонемных методах анализа на сифилис не различают тип антител (IgG, IgM или др.), а определяют суммарный ответ. К таким исследованиям относят микрореакции преципитации: RPR, VDRL и др.

При первичном и вторичном сифилисе чувствительность нетрепонемных тестов высокая (в случае RPR: 86 % при первичном, 100 % при вторичном), а чем выше чувствительность метода, тем больше вероятность, что тест выявит болезнь. Соответственно, если человек болен сифилисом, то результат теста со 100-процентной чувствительностью точно будет положительным.

Однако при использовании нетрепонемных тестов возможен и ложноположительный результат (выявление антител, несмотря на то что человек не болен сифилисом). Дело в том, что антитела против кардиолипина возникают не только при сифилисе, но и при некоторых других заболеваниях.

Поэтому при диагностике сифилиса нетрепонемный тест должен быть подтвержден с помощью более специфичного трепонемного.

У нетрепонемных тестов есть еще одна особенность. Антитела против кардиолипина появляются в острой фазе болезни. Поэтому, когда человек выздоравливает, их уровень снижается, так что по нему можно судить об успешности лечения.

Для чего используется исследование?

Когда назначается исследование?

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Окончательное решение о постановке диагноза зависит от результата других тестов (трепонемных).

Положительный результат должен быть подтвержден с помощью специфических трепонемных тестов.

Что означают результаты теста, который сдают повторно (после курса лечения)?

Что может влиять на результат?

Ложноположительные результаты могут быть:

Кто назначает исследование?

Врач общей практики, терапевт, инфекционист, венеролог.

Источник

Микрореакция преципитации (МР) на сифилис
Rapid Plasma Reagin (RPR)

Что такое микрореакция преципитации

Количественная микрореакция преципитации
Проводится методом серийного разведения исследуемой сыворотки крови.Титром преципитинов считают последнее разведение плазмы или сыворотки крови,где обнаружен преципитат.

Когда применяется микрореакция преципитации

Скрининг на сифилис
Массовое обследование определенных групп населения.Для скрининга применяются дешевые,простые и быстрые по исполнению тест системы,основанные на микрореакции преципитации.Скринингу на сифилис подвергаются:

Диагностика сифилиса
Для диагностики сифилиса применяются комбинация количественной модификации микрореакции преципитации и трепонемных тестов на сифилис.Серологическое обследование на сифилис назначается в следущих случаях:

Контроль за лечением сифилиса
Так как к моменту снятия с учета леченного больного сифилисом микрореакция преципитации с кардиолипиновым антигеном обычно негативируется, а позитивные специфические реакции (РИТ, РИФ, ИФА, РПГА.) могут наблюдаться долго после окончания лечения (поэтому эти тесты не могут служить критерием излеченности) микрореакция преципитации является основным тестом для установления критерия излеченности сифилиса.

Снижение титров нетрепонемных тестов в 4 и более раза в течении года после лечения подверждает эффективность проведенной терапии сифилиса и является критерием его излеченности( Приказ Минздрава РФ № 87 от 26.03.01 г,МЗ РФ Приказ от 25 июля 2003 г. N 327,Рекомендации CDC (USA) 2006)

Как проводится микрореакция преципитации

Материал для исследования: кровь из пальца,венозная кровь,спинномозговая жидкость.Взятие крови желательно производить натощак.

Схема микрореакции преципитации
Для проведения реакции используется классический VDRL-антиген (кардиолипин+лецитин+холестерин) с добавлением частиц угля для визуальной оценки результатов.теста.Исследуемая сыворотка крови перемешивается на стекле с антигеном.Если в сыворотке содержатся реагиновые антитела то образуются чёрные хлопья (флоккулянты), являющиеся признаком положительной реакции. При отсутствии реагиновых антител в сыворотке образования хлопьев (флоккуляции) не происходит.

Как оценивается микрореакция преципитации

Микрореакция становиться положительной в среднем через 4-5 недель после инфицирования.По мере развития сифилитической инфекции титры ее нарастают,при скрытом и позднем сифилисе количество антител уменьшается и микрореакция может быть оценена как слабоположительная или сомнительня,а иногда при третичном сифилисе и отрицательная.

Наиболее часто в мировой венерологии,а последнее время и в России результаты микрореакции оценивает совместно с трепонемными тестами РИФ и РПГА

Источник

Реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном

Весь контент iLive проверяется медицинскими экспертами, чтобы обеспечить максимально возможную точность и соответствие фактам.

У нас есть строгие правила по выбору источников информации и мы ссылаемся только на авторитетные сайты, академические исследовательские институты и, по возможности, доказанные медицинские исследования. Обратите внимание, что цифры в скобках ([1], [2] и т. д.) являются интерактивными ссылками на такие исследования.

Если вы считаете, что какой-либо из наших материалов является неточным, устаревшим или иным образом сомнительным, выберите его и нажмите Ctrl + Enter.

Реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном на сифилис в норме отрицательная.

Микрореакция преципитации позволяет выявить антитела к кардиолипиновому антигену бледной спирохеты. Микрореакция преципитации при изолированном применении служит не диагностическим, а отборочным тестом, в связи с чем на основании её позитивности диагноз сифилиса не устанавливают, а пациенту проводят диагностические тесты (РСК, ИФА). С помощью микрореакции преципитации обследуют лиц, подлежащих периодическим медицинским осмотрам на венерические заболевания, больных соматическими заболеваниями и др.

Чтобы отдифференцировать врождённый сифилис от пассивного носительства материнской инфекции, новорождённым необходимо провести серию исследований с определением титра антител: подъём титра в течение 6 мес после рождения свидетельствует о врождённом сифилисе, в то время как при пассивном носительстве антитела исчезают к 3-му месяцу.

При оценке результатов VDRL и RPR-тестов у детей грудного возраста с врождённым сифилисом необходимо помнить о феномене прозоны. Сущность этого феномена состоит в том, что для агглютинации антигены и антитела в этих реакциях необходимо, чтобы антигены и антитела находились в крови в соответствующем количестве. Когда количество антител значительно превышает количество антигенов, агглютинации не происходит. У некоторых детей грудного возраста с врождённым сифилисом содержание антител в сыворотке настолько велико, что в неразбавленной сыворотке не происходит агглютинации антител и нетрепонемных антигенов, используемых для диагностики сифилиса (тесты VDRL и RPR нереактивны). Поэтому у детей, обследуемых с целью диагностики врождённого сифилиса, возможен феномен прозоны. Во избежание ложноотрицательных результатов в таких случаях необходимо проводить исследования с разведением сыворотки и без него.

Микрореакция VDRL может быть негативной при раннем, позднем латентном и позднем сифилисе приблизительно в 25% случаев, а также у 1% больных вторичным сифилисом. В таких случаях необходимо использовать метод ИФА.

Ложноположительная реакция микропреципитации возможна при ревматических заболеваниях (например, системная красная волчанка, ревматоидный артрит, склеродермия), инфекциях (мононуклеоз, малярия, микоплазменная пневмония, активный туберкулёз, скарлатина, бруцеллёз, лептоспироз, корь, эпидемический паротит, венерическая лимфогранулёма, ветряная оспа, трипаносомоз, проказа, хламидиоз), беременности (редко), в старческом возрасте (около 10% людей в возрасте старше 70 лет могут иметь ложноположительную микрореакцию преципитации), при хроническом лимфоцитарном тиреоидите, гемобластозах, приёме некоторых гипотензивных средств, наследственной или индивидуальной особенности.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9], [10]

Источник

Кровь на RW (реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном, антитела IgG и IgM к Treponema pallidum)

Описание исследования

Характерные особенности сифилиса

Сифилис – хроническое инфекционное заболевание, поражающее многие органы и системы организма. Возбудителем инфекции является бледная трепонема. Окружающая среда для нее губительна, однако биологические жидкости и влажные среды – те убежища, которые позволяют бактерии чувствовать себя комфортно и безопасно. К таковым относится сперма, секрет влагалища, слизь, гной и т.п. Инфицирование сифилисом может происходить следующим образом:

Если организм поражен другими инфекциями, передающимися при половых контактах (например, герпесом, хламидозом, папиломовирусной инфекцией) или если при анальных контактах повреждена слизистая оболочка, это служит дополнительным фактором риска инфицирования сифилисом. У бледной трепонемы существует несколько антигенов, на которые организм вырабатывает антитела. Один из них имеет сходство с кардиолипином, применение которого позволяет обнаружить наличие антител к бледной трепонеме.

Любая фаза сифилиса является заразной, однако более всех отличаются в этом отношении первичная и вторичная стадии, если они сопровождаются наличием образований на коже и слизистых оболочках. Для попадания внутрь бледной трепонеме достаточно микроповреждений в коже или слизистой, откуда она стремится добраться в лимфатические сосуды, а затем и в лимфоузлы. После этого происходит распространение возбудителя по всему организму. Бледную трепонему может содержать слюна, грудное молоко, сперма и другие биологические среды инфицированного человека.

Продолжительность разных периодов сифилиса при классическом протекании заболевания следующая:

Первичная стадия характерна:

В конце первичной фазы происходит самопроизвольное заживление шанкра и переход лимфаденита в полиаденит (множественное воспаление лимфатических желез), длящийся до пяти месяцев.

Вторая фаза заболевания характеризуется масштабным высыпанием вторичных сифилид, которые появляются в несколько заходов, по 1,5-2 месяца каждый, а затем сами исчезают. Вторичные сифилиды полиморфны (имеют множество форм) – папулезные, пятнистые, пустулезные. Может появляться сифилитическое облысение (аллопеция), «ожерелье Венеры» (сифилитическая лейкодерма – многочисленные бесцветные пятна на шее). Второе полугодие вторичного сифилиса характеризуется исчезновением воспаления лимфатических желез.

Третичный период сопровождается образованием бугорков и гумм (третичных сифилидов). Он наступает в 40% случаев, когда болезнь не лечилась вообще или лечилась недостаточно. Периоды высыпания разделяются довольно длительными (иногда многолетними) промежутками времени, в которые инфекция никак себя не проявляет. Третичный сифилис сопровождается разрушением пораженных тканей и органов. Третичные сифилиды содержат совсем незначительное количество агентов инфекции, поэтому почти не представляют угрозы заражения. Иммунная система при этом «успокаивается», что делает возможным очередное инфицирование (возникновение ресуперинфекции).

Первые три года заболевания – это период, в который наиболее вероятно заражение плода. При беременности инфекция чревата:

Особенно опасны для плода пятый месяц беременности и процесс родов. Врожденный сифилис проявляется сразу после рождения и имеет признаки вторичного сифилиса. Поздний врожденный сифилис может проявиться в возрасте 5-17 лет и имеет признаки третичного сифилиса, характеризуемого триадой Гетчинсона:

Инфицирование сифилисом, как правило, подтверждается лабораторными тестами, однако, при наличии очевидных признаков, может быть доказано даже при отрицательных результатах исследований на характерные антитела.

Наиболее важно пройти диагностику следующим группам людей:

а) женщинам, планирующим стать матерью, т.к. возможны следующие варианты течения болезни:

б) беременным женщинам, т.к. своевременная диагностика и лечение в течение первых 4 месяцев беременности дадут возможность уберечь плод от заражения.

Данный тест объединяет два вида исследований:

Выявление суммарного количества антител классов IgG и IgM к Treponema pallidum может быть использовано двояко:

Появление первых признаков сифилиса или образование твердого шанкра являются предпосылкой для проведения лабораторного исследования, цель которого подтвердить факт инфицирования. Антитела обнаруживаются через три или в течение четвертой недели после образования первой сифилитической язвы. Первичная сифилома своим появлением знаменует начало первичной серопозитивной (т.е. характеризующейся продукцией антител) стадии сифилиса. Таким образом, данный специфичный метод позволяет достаточно рано диагностировать инфекцию.

Присутствие антител класса IgG может наблюдаться в организме человека достаточно долго, иногда всю оставшуюся жизнь.

Антитела классов IgG и IgM к кардиолипину являются иммунным ответом на высвобождение из повреждаемых сифилисом клеток липоидных и липопротеиноподобных элементов. Они выявляются у 70-80% обследуемых лиц с первичным сифилисом. Если болезнь находится во второй фазе или раннем «спящем» состоянии, они присутствуют практически в 100% случаев. Их исследование применяется для диагностики и контроля эффективности лечения сифилиса.

Как правило, реакция RPR бывает положительной через неделю-полторы после появления видимого знака первичного сифилиса – шанкра. Также результат теста бывает положительным через 3-5 недель после заражения. Вторая стадия сифилиса характеризуется снижением титра антител. При позднем сифилисе у 30% обследуемых по тесту RPR антитела вообще не обнаруживаются. Значительному уменьшению количества возбудителя способствует эффективная терапия (в течение года титр может снизиться в 4 и больше раз). В 90-98 % после проведение лечения результат теста – отрицательный.

Поскольку данное обследование не относится к специфическим, то не исключены ложноположительные реакции. Так как появление антилипоидных антител характерно не только для сифилиса, но и для других трепонемных инфекций, то они могут появляться как иммунный ответ на эти инфекции, особенно если таковые сопровождаются повреждением тканей (характерно для аутоиммунных заболеваний).

При получении положительного ответа на RPR-тест обязательно проводится осмотр дерматологом-венерологом, и повторно исследуется кровь.

Ложноотрицательные ответы RPR бывают крайне редко. Обычно они обусловлены эффектом «прозоны», возникающем в данном случае при наличии очень большого количества антител. («Прозона» в контексте анализа RPR – это «обратный эффект» при очень высоких титрах антител. Такое состояние может стать толчком для химических реакций, не имеющих отношения к исследованию, но меняющих оптическую плотность раствора. Итог – получение отрицательного показателя, как бы говорящего об отсутствии антител при их очень высокой концентрации фактически).

Подготовка к исследованию

Кровь на анализ сдается утром строго натощак, после 8-12 часового голодания. Накануне вечером исключить из рациона острую, жирную пищу, спиртные напитки.

Забор крови не осуществляется сразу после массажа, физиопроцедур, флюорографии, кольпоскопии, гастроскопии, биопсии, рентгеновского, мануального, инструментального, ректального, ультразвукового исследования, других диагностических и/или лечебных манипуляций.

Показания к исследованию

Исследование специфических суммарных антител IgG и IgM к антигенам бледной трепонемы назначается:

Исследование специфических суммарных антител IgG и IgM к кардиолипину проводится:

Интерпретация исследования

Тест является качественным.

Результат исследования суммарных антител классов IgG и IgM к бледной трепонеме описывается коэффициентом позитивности (КП):

КП = оптическая плотность конкретной пробы/пороговое значение

Универсальность коэффициента позитивности позволяет применять его при проведении всех иммуноферментных исследований. Данная величина отражает, насколько позитивен конкретный показатель анализа. Он дает возможность врачам более точно истолковывать полученные результаты. Концентрация антител и коэффициент позитивности – показатели, не связанные между собой, поэтому КП нецелесообразно применять для наблюдения динамики течения заболевания или действенности проводимого лечения.

Интерпретация полученного показателя:

Реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном описывается формулировками: «отрицательная», «положительная».

Нормой в обоих исследованиях является отрицательный результат.

Положительный ответ свидетельствует:

Отрицательный результат может быть:

Сомнительным считается результат, когда невозможно вполне однозначно подтвердить наличие антител, характерных для присутствия в организме агента сифилиса. Для получения точного результата через полторы-две недели кровь на анализ отбирается повторно и еще раз исследуется.

Результат теста выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример по данному анализу представлен ниже:

Ф.И.О.: Сидоров Иван Петрович Пол: м Дата рождения: хх.хх.хххх

Дата забора биоматериала: хх.хх.хххх

Исследование

Результат

Нормы интерпретации

Примечание

[506] Кровь на сифилис (реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном, антитела IgG и IgM к Treponema pallidum)

Дата выдачи (дата исследования): хх.хх.хххх

Реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном

Антитела класса M и G к Treponema pallidum

Интерпретация результата осуществляется с учетом клинической картины, истории болезни пациента, а также показателей других лабораторных исследований.

Источник

Сифилис RPR, антикардиолипиновый тест

Описание

Сифилис (люэс) — инфекционное заболевание, вызываемое бледной трепонемой (Treponema pallidum), передающееся в основном половым путем, склонное к хроническому течению и поражающее большинство органов и систем организма.

RPR — неспецифический скрининговый тест (модификация RW), выявляющий иммуноглобулины класса IgG и IgM к фосфолипидам, выделяющимся из повреждённых клеток пациента больного сифилисом.

Тест RPR рекомендован приказом МЗ РФ для первичного скрининга и наблюдения за ходом терапии сифилиса.

Антифосфолипидные антитела
Антифосфолипидные антитела, выявляемые RPR, находят у 70–80% пациентов с первичным сифилисом и почти у 100% пациентов с вторичным и ранним латентным сифилисом. Чаще всего положительная RPR-реакция наблюдается через 3–5 недель после инфицирования или на 7–10 день после появления первичного шанкра. В 90–98% случаев после лечения сифилиса результат RPR-теста становится отрицательным.

Тест RPR неспецифический, поэтому возможно возникновение ложноположительных реакций. Антифосфолипидные антитела появляются не только вследствие сифилиса, но и в ответ на развитие нетрепонемных заболеваний острой или хронической природы, при которых наблюдается повреждение тканей (например, при аутоиммунных заболеваниях).

При получении позитивного RPR-теста, пациент в обязательном порядке должен пройти обследование у венеролога с повторным исследованием крови с помощью специфического трепонемного теста на диагностику сифилиса Трепонема паллидум.

Изредка RPR может дать ложноотрицательный результат (это обусловлено сверхвысоким титром антифосфолипидных антител), эта ситуация исключается при одновременном назначении RPR и диагностики сифилиса Т. pallidum. Совместное проведение тестов RPR и ИФА-теста IgG/IgM представляет лучший вариант скринингового исследования для обнаружения или исключения сифилиса на всех стадиях.

Интерпретация результатов
Референсные значения: отрицательно.

Источник

• ← что такое платиновый альбом
• что такое разбивочный план →