что такое ложноотрицательный тест на коронавирус пцр
«Вероятность обнаружить вирус снижается». Когда нужно сдавать ПЦР-тест
В Роспотребнадзоре объяснили ложноотрицательные ПЦР-тесты при COVID-19
Ложноотрицательный результат теста на коронавирус может происходить из-за того, что инфицированный человек сдает анализ на поздних стадиях болезни. Такое мнение выразили в Роспотребнадзоре. Там подчеркнули, что вырастает шанс получить такой результат у больного COVID-19 после четвертого-пятого дня болезни.
При заражении COVID-19 у больного отсутствуют специфические признаки, которые характерны только для этой инфекции. Наиболее часто заразившийся сталкивается с респираторными симптомами, что может говорить не только о коронавирусе, но и ряде других заболеваний, включая грипп и ОРВИ.
По этой причине единственным способом диагностики коронавируса остается ПЦР-тестирование. Впрочем, в довольно большой доле случаев они оказываются недостоверными, о чем еще год назад говорили специалисты Минздрава, указывая на то, что 30-40% тестов дают ложноотрицательный результат. В частности, тогда считалось, что в большей части случаев на это влияют ошибки при заборе материала и качество самого теста.
Тем не менее существует и другое обоснование. По словам заместителя директора по клинико-аналитической работе ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора профессора Натальи Пшеничной, на результате анализа сказывается период заболевания, в который заболевший сдает ПЦР-тест. На ранних стадиях болезни получить положительный результат значительно выше.
«После четвертого-пятого дня болезни вероятность обнаружить вирус в носоглотке снижается, а респираторные симптомы могут быть в это время в самом разгаре. Если проводить тестирование в эти сроки, то можно получить отрицательный результат», — приводит слова специалиста РИА «Новости».
Общую картину по тестированию на COVID-19 также дополняет тот факт, что среди новых заболевших появляются и вакцинированные люди, но они при этом выделяют вирус в меньшем количестве и не такое продолжительное время, констатировала замдиректора Московского научно-исследовательского института эпидемиологии и микробиологии имени Г. Н. Габричевского Татьяна Руженцова.
Однако сомнительный или ложный результат может давать любая тестовая система. Эксперты неоднократно выражали мнение, что ложные результаты на коронавирус связаны связаны как с ошибками медработников, так и пациентов. Иными словами, речь идет о несоблюдении правил и рекомендаций по тестированию.
Еще одну версию выдвигал директор Института медицинской паразитологии, тропических и трансмиссивных заболеваний Сеченовского университета Александр Лукашев. Газете «Известия» он рассказывал, что COVID-19 — специфический вирус в том плане, что его можно не обнаружить в доступном биоматериале. Если другие коронавирусы размножаются в носоглотке и ротоглотке, где их можно легко найти, то SARS-CoV-2 у значительной части больных присутствует только в бронхах.
Согласно данным Всемирной организации здравоохранения, точность ПЦР-тестов на коронавирус, несмотря на их неоднозначную оценку, составляет 95%.
Вместе с этим в ВОЗ подчеркивают, что на результаты тестирования влияет очень много факторов. Это касается и процесса забора материала, и транспортировки, и хранения биоматериалов. Важно и то, правильно ли подготовлен пациент к сдаче анализа и проверена ли тест-система в конкретной лаборатории.
NAME] => URL исходной статьи [
Ссылка на публикацию: rambler.ru
Код вставки на сайт
«Вероятность обнаружить вирус снижается». Когда нужно сдавать ПЦР-тест
В Роспотребнадзоре объяснили ложноотрицательные ПЦР-тесты при COVID-19
Ложноотрицательный результат теста на коронавирус может происходить из-за того, что инфицированный человек сдает анализ на поздних стадиях болезни. Такое мнение выразили в Роспотребнадзоре. Там подчеркнули, что вырастает шанс получить такой результат у больного COVID-19 после четвертого-пятого дня болезни.
При заражении COVID-19 у больного отсутствуют специфические признаки, которые характерны только для этой инфекции. Наиболее часто заразившийся сталкивается с респираторными симптомами, что может говорить не только о коронавирусе, но и ряде других заболеваний, включая грипп и ОРВИ.
По этой причине единственным способом диагностики коронавируса остается ПЦР-тестирование. Впрочем, в довольно большой доле случаев они оказываются недостоверными, о чем еще год назад говорили специалисты Минздрава, указывая на то, что 30-40% тестов дают ложноотрицательный результат. В частности, тогда считалось, что в большей части случаев на это влияют ошибки при заборе материала и качество самого теста.
Тем не менее существует и другое обоснование. По словам заместителя директора по клинико-аналитической работе ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора профессора Натальи Пшеничной, на результате анализа сказывается период заболевания, в который заболевший сдает ПЦР-тест. На ранних стадиях болезни получить положительный результат значительно выше.
«После четвертого-пятого дня болезни вероятность обнаружить вирус в носоглотке снижается, а респираторные симптомы могут быть в это время в самом разгаре. Если проводить тестирование в эти сроки, то можно получить отрицательный результат», — приводит слова специалиста РИА «Новости».
Общую картину по тестированию на COVID-19 также дополняет тот факт, что среди новых заболевших появляются и вакцинированные люди, но они при этом выделяют вирус в меньшем количестве и не такое продолжительное время, констатировала замдиректора Московского научно-исследовательского института эпидемиологии и микробиологии имени Г. Н. Габричевского Татьяна Руженцова.
Однако сомнительный или ложный результат может давать любая тестовая система. Эксперты неоднократно выражали мнение, что ложные результаты на коронавирус связаны связаны как с ошибками медработников, так и пациентов. Иными словами, речь идет о несоблюдении правил и рекомендаций по тестированию.
Еще одну версию выдвигал директор Института медицинской паразитологии, тропических и трансмиссивных заболеваний Сеченовского университета Александр Лукашев. Газете «Известия» он рассказывал, что COVID-19 — специфический вирус в том плане, что его можно не обнаружить в доступном биоматериале. Если другие коронавирусы размножаются в носоглотке и ротоглотке, где их можно легко найти, то SARS-CoV-2 у значительной части больных присутствует только в бронхах.
Согласно данным Всемирной организации здравоохранения, точность ПЦР-тестов на коронавирус, несмотря на их неоднозначную оценку, составляет 95%.
Вместе с этим в ВОЗ подчеркивают, что на результаты тестирования влияет очень много факторов. Это касается и процесса забора материала, и транспортировки, и хранения биоматериалов. Важно и то, правильно ли подготовлен пациент к сдаче анализа и проверена ли тест-система в конкретной лаборатории.
Специалист лаборатории объяснила, почему ПЦР-тесты на коронавирус могут выдавать ошибку
Известно, что результаты ПЦР-теста на коронавирус могут быть как ложноположительными, так и ложноотрицательными. Заведующая лабораторией молекулярной диагностики «Инвитро» в Москве Наталья Гасилова объяснила «Доктору Питеру», какие причины могут повлиять на результат в процессе тестирования.
Ранее в Роспотребнадзоре озвучивали правила, которые необходимо соблюдать пациентам перед тестированием. К примеру, за несколько часов до взятия мазка не рекомендуется есть и пить, пользоваться спреями для горла и носа, а также чистить зубы и красить губы. Всё это, по словам специалистов, может повлиять на правильность результата. Заведующая московской лабораторией молекулярной диагностики «Инвитро» Наталья Гасилова назвала «Доктору Питеру» еще несколько причин, которые могут приводить к выдаче ложных результатов ПЦР-теста.
Как получают ложноположительные результаты?
Основная причина — так называемая кросс-контаминация, перекрестное загрязнение одного образца содержимым другого. Это может произойти на любом этапе тестирования — взятии мазка, транспортировки или уже в лаборатории.
По словам специалиста, загрязнение «чистого» образца может случиться и при транспортировке анализов.
В лаборатории, кроме регулярной смены перчаток, важно аккуратно открывать пробирки — так, чтобы микроаэрозоль из одной пробирки не попал в другую.
Возможные причины ложноотрицательных результатов
По словам Натальи Гасиловой, здесь основная причина кроется в чувствительности тест-системы, которая применяется в конкретной лаборатории.
Еще на результат влияет корректность взятия биоматериала со слизистой оболочки носо- и ротоглотки: к примеру, мазок взяли только из зева, а надо еще и из носа. Повлияет на него также малая вирусная нагрузка в биоматериале — когда тест выполняется в самом начале болезни или, наоборот, практически при выздоровлении, когда вирус уже уходит из организма.
Читайте также
Общая причина, объясняющая как ложноположительные, так и ложноотрицательные результаты может скрываться в ненадежной системе идентификации образцов.
Фокус в группе: почему ошибается тест на COVID-19
ПЦР-тесты на COVID-19 часто выдают ошибочный результат. Причину этого решили выяснить французские ученые. Они проанализировали 80 пациентов с положительным анализом ПЦР и 80 — с отрицательным при наличии всех остальных симптомов коронавирусной инфекции и плохим КТ легких. Исследователи обнаружили маркеры сильного воспаления (С-белок) и высокие тромбоциты у больных из второй группы. Российские эксперты сомневаются в возможности прямого влияния этих факторов на результаты ПЦР-исследований. По их мнению, невысокая точность тестов связана с тем, что вирус на момент взятия анализа уже «спустился» ниже носоглотки, или забор мазка производили люди без нужных навыков.
Загадочные связи
В исследовании приняли участие пациенты 11 госпиталей из Франции и Бельгии. Ученые отобрали экспериментальную и контрольные группы по 80 человек в каждой из Университетского госпитального Центра в Нанте, медицинского центра в Авиньоне, клинике Сен-Пьер в Оттиньи (Бельгия) и др.
80 человек имели все признаки COVID-19, но при этом отрицательный ПЦР-тест. В контрольной группе другие 80 пациентов имели такие же признаки заболевания, но при этом положительный подтвержденный анализ. Группа ученых во главе с французским медиком Жан-Батистом Ласкарру пыталась ответить на вопрос: отличаются ли какие-то клинические, биологические или рентгенологические характеристики у этих больных? Что именно мешает ПЦР-анализу точно диагностировать COVID-19?
В результате проведенной работы исследователи пришли к выводу, что на результаты ПЦР-теста не влияет ни время проведения анализа (длительность отсрочки от появления первых симптомов), ни терапия, которая во многих случаях была одинаковой, ни время, проведенное в стационаре, ни смертность в обоих группах, ни процент попадания на ИВЛ. Однако наличествуют биохимические показатели крови, которые ясно коррелируют с ложноотрицательным ПЦР-тестом. Это высокие тромбоциты и показатели С-белка (белок острой фазы, концентрация которого в крови повышается при воспалении).
В статье не объяснено, как именно эти характеристики крови влияют на результаты теста, там лишь описана корреляция, суть которой еще предстоит понять. Интересно также, что меньшую ложноотрицательность показывают пациенты с головной болью и усталостью. У них ПЦР-тест чаще срабатывает правильно.
Французские ученые указывают на ограниченность ПЦР-тестов на COVID-19, которые далеко не всегда правильно интерпретируют причину заболевания. «КТ грудной клетки обладает более высокой чувствительностью для диагностики COVID-19 и может рассматриваться как основной инструмент для обнаружения инфекции в зоне эпидемии», — говорят авторы статьи.
Известно, что средняя чувствительность ПЦР-тестов и так невысока — 60–70%. Однако, судя по данному исследованию, ее точность можно оценить как еще более низкую. Что ставит под сомнение смысл тестов ПЦР, например, при возвращении из заграничных поездок, выходе с карантина в школы, институты и на работу.
Ищем объяснение
Российские эксперты сомневаются во влиянии высоких тромбоцитов и содержания С-белка на результат ПЦР-теста, хотя и не отрицают, что корреляция может иметь место.
— Авторы статьи нашли корреляцию, но суть ее не пояснили, — сказал руководитель лаборатории геномной инженерии МФТИ Павел Волчков. — ПЦР-тест на COVID-19 — это мазок из ротоглотки. А С-белок находится в сыворотке крови. Вряд ли одно может влиять на другое. Однако я не отрицаю, что описанная в статье корреляция может иметь место.
Павел Волчков объяснил, что есть высокосходящиеся корреляции, которые являются статистически достоверными. Например, количество съеденного мороженого может напрямую коррелировать с количеством утонувших. Это происходит потому, что мороженое чаще едят летом, когда устанавливается жаркая погода. Тогда же начинается и купальный сезон. Но это не значит, что мороженое приводит к утоплению, отметил эксперт.
В случае с ложноотрицательными тестами тоже нужно найти не корреляцию, а причину. Ученый считает, что она может заключаться в отсутствие вируса в рото- и носоглотке части пациентов. С экспертом согласен директор Института медицинской паразитологии, тропических и трансмиссивных заболеваний им. Е.И. Марциновского Сеченовского университета (вуз — участник проекта повышения конкурентоспособности образования «5-100») Александр Лукашев.
— Во время первой волны в Китае в феврале 2020 года было показано, что если брать материал из бронхов или легких, то поставить диагноз можно практически во всех случаях. Но это делать нецелесообразно — сложно, неприятно для больного и очень опасно для врача. То есть дело не в чувствительности теста, а в том, что по физиологическим причинам вирус уже «спустился» ниже, — сообщил ученый «Известиям».
По словам Александра Лукашева, результаты ПЦР-анализа зависят от того, когда взят тест. Ведь известно, что наиболее высокое содержание вируса фиксируется еще до появления клинических симптомов. Что касается высоких тромбоцитов и содержания в крови реактивного С-белка — это скорее характерно для более поздних стадий болезни, отметил эксперт в разговоре с «Известиями».
— У ПЦР-теста техническая чувствительность обычно выше 98%, — пояснил Александр Лукашев. — Но его практическая чувствительность у больных COVID-19 может быть и 60%, и 70% по физиологическим причинам — вируса в ротоглотке просто нет. И эти проблемы едины для тестов любых производителей во всем мире.
Отрицает прямое влияние высоких тромбоцитов в крови и реактивного С-белка на ПЦР-тест и заместитель директора по научной работе ИФХЭ РАН Олег Батищев.
— Параметры крови на то, что находят на слизистых, принципиально не могут влиять, — подчеркнул эксперт. — Однако тесты действительно дают ложноотрицательные результаты, так как сам этот мазок не так просто взять. Для этого нужна определенная подготовка как врачу, так и пациенту.
Олег Батищев отметил, что если человек за два часа до анализа поел или попил воды, ПЦР-тест может не сработать.
— Особенно высока частота ложных срабатываний, когда пациент берет мазок самостоятельно, как это делалось у нас в первую волну, чтобы минимизировать контакты. Сам себе человек так глубоко в ротоглотку залезть вряд ли может. Думаю, причина ложноотрицательности этих тестов именно в заборе материала, — сообщил эксперт «Известиям».
Подтвердил эту информацию и специалист компании «Инвитро», врач клинической лабораторной диагностики Дмитрий Бусыгин. Он также считает, что на данные ПЦР-теста высокие тромбоциты и С-белок повлиять никак не могут, они лишь отражают реакцию организма на инфекцию.
Эксперт напомнил, что в постановке диагноза можно ориентироваться на дополнительные лабораторные данные, в том числе и антитела. Если же сомнения остаются, на этот случай предусмотрено несколько заборов ПЦР-мазка.
«Если человек покурил, тест может быть ложноотрицательным»: что не так с тестами на COVID-19
Насколько точны тесты на коронавирус
Один из основных методов борьбы с коронавирусом, который практикуется по всему миру — проведение масштабного тестирование населения на наличие заболевания. Однако результаты тестов, даже самых точных, могут подвести. Чувствительность метода полимеразной цепной реакции (ПЦР), рекомендованного ВОЗ для тестирования на COVID-19 — 70-80%, говорил в начале апреля на конгрессе «Человек и лекарство» главный внештатный пульмонолог Минздрава Сергей Авдеев. «У нас есть пациенты с отрицательными результатами теста, но у них есть болезнь COVID-19», — рассказывал он.
Авдеев приводил цифры исследования, согласно которым из 1400 пациентов у 300 был отрицательный лабораторный тест на COVID-19, однако результаты компьютерной томографии (КТ) легких показывали изменения, характерные для этого заболевания. Врач предупреждал, что ложноотрицательные тесты на COVID-19 приводят к ошибкам в маршрутизации пациентов с внебольничной пневмонией.
Существование проблемы признавал и мэр Москвы Сергей Собянин. Как заявлял он 30 апреля в эфире «России 24», до 50% тяжелобольных коронавирусом, попавших в том числе в реанимацию, получали по две отрицательных пробы. В отношении этих пациентов было видно, что они тяжело больны и «это точно коронавирус», говорил мэр.
«Сейчас в клиниках большое количество больных с диагнозом пневмония тяжелого течения, в том числе с масштабным поражением легких, у которых отрицательный мазок на COVID-19», — подтверждает Юлия Ткаченко, руководитель департамента развития медицины компании BestDoctor, разрабатывающей технологический сервис дополнительного медстрахования.
Контекст За последние недели стало известно о двух смертях топ-менеджеров, у которых была диагностирована пневмония, но на момент смерти данных о коронавирусе не было. Речь идет об Андрее Варичеве — гендиректоре управляющей компании одного из крупнейших горно-металлургических холдингов «Металлоинвеста», и замгендиректора авиастроительной корпорации «Иркут» Игоре Виноградове. У Варичева была двусторонняя пневмония, но два теста на COVID-19 дали отрицательный результат, рассказывал Forbes знакомый его семьи. У Винорадова диагностировали двустороннюю пневмонию, причем источник «Ведомостей» говорил, что не исключено заражение коронавирусом.
Что не так с анализами
Среди причин, по которым тесты дают ложноотрицательный результат, опрошенные Forbes эксперты называли несвоевременный забор анализа и нарушение инструкции по сбору биоматериала, а также проверку результатов менее чувствительными системами.
Метод ПЦР – очень чувствительный и если вирус есть в образце, тест-система покажет его наличие, говорит исполнительный директор биомедицинского холдинга «Атлас» Александр Карасев. Но коронавирус во время болезни по разным причинам может проявиться только в легких. «Берут мазок из носа и изо рта, а там концентрация вируса минимальная. Тест-система фиксирует отрицательный результат», — объясняет он.
Период, когда ПЦР-система может обнаружить вирус, короткий – по некоторым данным, с третьего по девятый день, продолжает Карасев, это первые дни клинических проявлений, когда у заболевшего появляется температура, затруднение дыхания, чувство тяжести в грудной клетке, головная боль и кашель. В остальные дни вероятность обнаружить вирус в мазке из носа и рта составляет всего около 40%, отметил эксперт.
С ним согласна Юлия Ткаченко из BestDoctor. «Ученые до конца не могут сказать, ПЦР-тест на COVID-19 дает ложноотрицательный результат потому, что вирус «спустился» или его в носоглотке и не было – он избирательно «пошел» в нижние дыхательные пути, в ткань легких, а не в эпителий носоглотки», — рассуждает она.
Ложноотрицательные результаты ПЦР-теста могут быть связаны с тем, что мазок был взят с нарушением инструкции, говорит Александр Карасев из «Атласа». «Если говорить про мазок из носа, то он должен быть взят из носовых раковин, которые уходят примерно на 2 см вглубь. Кроме того, нужно захватить достаточный объем биоматериала для проведения диагностики – если вы только коснетесь стенок носа, то материала может не хватить для определения РНК вируса», — говорит Карасев.
При взятии мазка из ротоглотки может быть еще больше особенностей, продолжает он: выделение вирусной РНК сильно тормозит курение. «Если человек только что покурил, то даже при правильном взятии мазка тест может быть ложноотрицательным», — отмечает Карасев. Кроме того, блокируют выделение РНК пломбы из амальгамы (сплава серебра или меди с добавлением ртути — Forbes), говорит исполнительный директор «Атласа». «Если пациент прополоскал рот с применением антисептика или других средств, которые могут смыть вирус со слизистой, то тоже можно получить ложноотрицательный результат», — подчеркивает Карасев.
По его словам, для надежного результата должна «хорошо сработать» целая цепочка мероприятий: подготовка к взятию, взятие биоматериала, транспортировка образца в лабораторию и выполнение инструкций к тест-системе в ней, а затем — интерпретация результатов.
Важно, чтобы мазок, который берут у человека, транспортировали не при комнатной температуре, а, чтобы он был помещен в консервирующую среду, добавил Карасев. «Мы берем мазок изо рта — там присутствует множество ферментов, которые способствуют разрушению РНК вируса. Если правильно не законсервировать образец, то идеальная чувствительность тест-системы также снижается», — пояснил специалист.
Если отрицательных тестов было несколько, а человек умер от коронавирусной инфекции, то вряд ли дело в неправильной транспортировке образцов, возражает гендиректор компании «ДНК-Технологии», которая производит ПЦР-тесты, Владимир Колин. По его словам, если референсная лаборатория использует менее чувствительный тест, то он может дать ложноотрицательный результат. «Ранее были случаи, когда мы ловили своими тестами заболевание, референсная лаборатория говорила, что коронавируса нет, а человек потом заболевал. Таких случаев было несколько», — вспоминает Колин. Однако сейчас чувствительность тестов у всех компаний стала выше: все работают и стараются улучшить свой продукт, добавил он.
Как врачи ставят диагноз
Главный внештатный пульмонолог Минздрава Сергей Авдеев в апреле говорил, что наиболее эффективным методом выявления COVID-19 у пациентов является КТ легких: его чувствительность выше, чем чувствительность методов ПЦР-диагностики. Чувствительность мазка, не только в России, но и в других странах, не такая высокая – 60-65%, соглашается Юлия Ткаченко. Поэтому в клиниках врачи в первую очередь обращают внимание не на результат теста, а на картину пневмонии именно на КТ. «Пациентам со сниженной сатурацией (содержанием кислорода в крови), легкие которых дышат плохо, делают КТ и смотрят, какая там картина», — рассказывает она. На основании низкого содержания кислорода в крови и характерных КТ-симптомов для вирусной, и в частности COVID-19 пневмонии, пациенту ставят коронавирусную инфекцию, даже если тест отрицательный, отметила Юлия Ткаченко.
Если по КТ найдены симптомы – характерные затемнения по краям легких с определенной прозрачностью легочной ткани, то может быть поставлен диагноз коронавирусной пневмонии без лабораторного подтверждения, согласен Карасев. И один, и другой метод являются надежными, говорит он. «Метод ПЦР имеет 99% чувствительности в идеальных условиях. Точность диагностики по КТ – около 80%. По хорошему, если у пациента с симптомами тест ПЦР показал отрицательный результат, то человеку должны сделать и КТ, и тест на антитела», — заключил он.
Когда заболевание проявилось активно, ПЦР-тест уже не так важен, добавляет Ткаченко. Если пациент контактировал с заболевшим, у него есть легкие симптомы, то имеет смысл делать тест и после этого следить за развитием заболевания – либо проявятся симптомы пневмонии (температура, нарастают признаки дыхательной недостаточности), либо начнется выздоровление, говорит она.
10 миллиардеров, которые зарабатывают на препаратах и тестах для борьбы с COVID-19
10 миллиардеров, которые зарабатывают на препаратах и тестах для борьбы с COVID-19