что такое клеточность костного мозга
Что такое клеточность костного мозга
Часть 1. История вопроса, FAB-классификация, патогенез.
(лекция для врачей и студентов)
В конце 30-х, начале 40-х годов ХХ столетия внимание исследователей привлекла группа заболеваний проявляющихся анемией, рефрактерной к какой-либо терапии. Больные с такой патологией не отвечали на лечение препаратами железа, витаминами группы В и фолиевой кислотой, что дало основание использовать для обозначения данной болезни термина «рефрактерная анемия». В отечественной литературе эти заболевания обычно рассматривылись под термином «ахрестические анемии».
Дальнейшие исследования позволили выявили у больных с резистентной к терапии анемией, как с увеличением количества бластных клеток в костном мозге, так и без, ряд особенностей. Эти особенности касались в первую очередь морфологии костного мозга (нарушение архитектоники ростков гемопоэза, изменения стромальной ткани, признаки дисплазии кроветворных клеток). Кроме того, при выполнении цитогенетического исследования у таких больных часто выявлялись изменение кариотипа гемопоэтических клеток.
Цитогенетическими и ферментными методами была доказана клональная (опухолевая) природа заболевания. Характерной особеностью клеток, происходящих из опухолевого клона, при миелодиспластическом синдроме является их морфологическая и функциональная неполноценность.
Для обозначения данной группы заболеваний был принят термин «миелодиспластический синдром» в рамках которого были описаны пять самостоятельных нозологических форм (заболеваний).
Сегодня общепринятой является классификация МДС разработанная Франко-Америко-Британской исследовательской группой (FAB) и опубликованная в 1982 году. В основе классификации лежат четыре признака:
— количество бластов в костном мозге;
— количество бластов в периферической крови;
— количество атипичных (кольцевидных) сидеробластов в костном мозге;
— количество моноцитов в периферической крови.
Таблица 1. FAB-классификация миелодиспластического синдрома (по Bennett et al., 1982).
а) количество бластов в костном мозге менее 5%
б) количество кольцевых сидеробластов в костном мозге менее 15%
в) количество бластов в периферической крови менее 1%
г) количество моноцитов в периферической крови менее 1х10^9/л
2.Рефрактерная анемия с кольцевыми сидеробластами:
а) количество бластов в костном мозге менее 5%
б) количество кольцевых сидеробластов в костном мозге не менее 15%
в) количество бластов в периферической крови менее 1%
г) количество моноцитов в периферической крови менее 1х10^9/л
3.Рефрактерная анемия с избытком бластов:
а) количество бластов в костном мозге более 5%, но менее 20%
б) количество кольцевых сидеробластов в костном мозге менее 15%
в) количество бластов в периферической крови менее 5%
г) количество моноцитов в периферической крови менее 1х10^9/л
4.Рефрактерная анемия с избытком бластов на стадии трансформации:
а) количество бластов в костном мозге более 20%, но менее 30%
б) количество кольцевых сидеробластов в костном мозге менее 15%
в) количество бластов в периферической крови менее 1%
г) количество моноцитов в периферической крови менее 1х10^9/л
5.Хронический миеломоноцитарный лейкоз:
а) количество бластов в костном мозге менее 20%
б) количество кольцевых сидеробластов в костном мозге любое
в) количество бластов в периферической крови менее 5%
г) количество моноцитов в периферической крови не менее 1х10^9/л
Таблица 2. Частота встречаемости каждого из нозологических вариантов МДС, длительность выживания и вероятность трансформации в острый лейкоз.
частота (%) выживаемость (мес) вероятность(%)
1.Рефрактерная анемия: 25 37 11
2.Рефрактерная анемия с кольцевыми сидеробластами: 18 49 5
3.Рефрактерная анемия с избытком бластов: 28 9 23
4.Рефрактерная анемия с избытком бластов
на стадии трансформации: 12 6 48
5.Хронический миеломоноцитарный лейкоз: 17 22 20
Патогенез. Отправной точкой в развитии МДС является мутация стволовой клетки крови. Потомки мутировавшей клетки получают биологическое преимущество перед нормальными гемопоэтическими клетками, что позволяет им полностью колонизировать костный мозг, вытесняя нормальные гемопоэтические клетки. Особенностью мутации стволовой клетки крови при МДС является частичное сохранение ее потомками способности к созреванию до зрелых клеток крови. Однако, процесс созревания носит неэффективный характер, что приводит к уменьшению количества зрелых клеток в периферической крови. Кроме количественных изменений в составе клеток периферической крови имеет место и снижение их функциональной активности.
Немаловажную роль в развитии патологического клона гемопоэтических клеток играет стромальное микроокружение, однако конкретные механизмы вовлечение стромальной ткани в патологический процесс при МДС изучены еще недостаточно.
Таблица 4. Морфологические признаки дисплазии кроветворения при исследовании аспирата костного мозга (по Bartl R, Frisch B и Baumgart R, 1992).
— большие мегакариоциты с одним или несколькими мелкими круглыми ядрами
— увеличение бластных клеток
— гипо- и гипергранулярность
— базофилия цитоплазмы зрелых клеток
— эозинофилы с кольцевыми ядрами
— моноциты с множественными вытянутыми лопастями цитоплазмы
— афзурофильные гранулы в цитоплазме
Ниже представлены несколько фотографий, иллюстрирующих морфологические признаки дисплазии кроветворения.
Рисунок 1. Дисплазия эритроидного ростка в костном мозге: мегалобластоидность, асинхронность ядер, тельца Жоли.
Рисунок 2. Дисплазия мегакариоцитарного ростка в костном мозге: микромегакариоцит.
Рисунок 3. Дисплазия гранулоцитарного ростка в костном мозге: значительная редукция числа гранул.
Рисунок 4. Костный мозг больного рефрактерной сидеробластной анемией: кольцевые сидеробласты.
Таблица 5. Гистологические признаки дисплазии кроветворения при исследовании биоптата костного мозга (по Bartl R, Frisch B и Baumgart R, 1992).
Клеточность костного мозга:
— гиперклеточный (свыше 50% случаев)
— нормоклеточный (30-40% случаев)
— гипоклеточный (менее 20% случаев)
— атипичная локализация незрелых предшественников
— атипичная локализация эритроцитарных предшественников
— атипичная локализация мегакариоцитов
— интраваскулярное расположение гемопоэтических клеток
— расширение синусоидов со склерозом стенок
— интростициальный и парамегакариоцитарный фиброз
— увеличение тучных клеток
— увеличение костного преобразования
[an error occurred while processing this directive]
Что такое клеточность костного мозга
Цель исследования
Оценка особенностей миелограммы костного мозга трубчатых костей.
Материалы и методы
Препараты для подсчета миелограммы делались из разных участков костного мозга трубчатых костей, чаще всего использовались ткани, прилежащие к эндосту. В ходе микроскопического исследования производили дифференцированный подсчет клеток желтого костного мозга в предварительно окрашенных и зафиксированных мазках. Красный костный мозг у взрослого человека располагается в ячейках губчатого вещества плоских и коротких костей, эпифизов длинных костей, желтый костный мозг заполняет костномозговые полости диафизов длинных (трубчатых) костей. У взрослого человека красный костный мозг содержится только в ячейках губчатого вещества плоских костей (грудине, крыльях подвздошных костей), в губчатых костях и эпифизах трубчатых костей. В диафизах, т. е. в костномозговых полостях, находится желтый костный мозг. В обычной медицинской практике необходимость в миелограмме появляется, как правило, в случае диагностики заболеваний крови и при лучевой терапии по разным показаниям. Клеточный состав костного мозга оценивается по результатам исследования пунктата грудины или подвздошной кости [2], полученного с помощью иглы И.А. Кассирского. Для диагностики гипопластических состояний, выявления лейкозных инфильтратов и раковых метастазов, а также миелодиспластического синдрома и некоторых видов костной патологии используют трепанобиопсию подвздошной кости, которую проводят с помощью специального троакара [4]. Потребности в получении костного мозга из трубчатых костей нет, тем более что пункция трубчатых костей невозможна из-за высокой прочности кортикального слоя. В процессе хирургической практики создаются ситуации, когда костный мозг трубчатых костей доступен без каких-либо специальных манипуляций (например, при ампутации нижних конечностей при критических ишемиях, травматических повреждениях, сопровождающихся необходимостью ампутации конечности). При оперативном вмешательстве на трубчатой кости во время ампутации забор костного мозга из конечности, которая подлежит удалению, становится процедурой доступной и легкой. Костный мозг, полученный из трубчатой кости, во время операции может быть использован для подсчета миелограмм.
Результаты исследования
Заключение
Рецензенты:
Селедцов В.И., д.м.н., профессор, директор центра медицинских биотехнологий Балтийского федерального университета им. И. Канта, г. Калининград;
Булычева Т.И., д.м.н., профессор, ФГБУ ГНЦ МЗ РФ, г. Москва.
Миелограмма
Фиксированные и окрашенные препараты костного мозга исследуют сначала под малым увеличением. При этом оценивают:
В результат подсчета миелограммы должны входить следующие виды клеток:
Отдельно на бумаге подсчитывают количество митозов. Выражают их на 100 клеток в каждом ряду.
Костно-мозговые индексы.
Клеточный состав костного мозга подвержен значительным количественным и качественным колебаниям, поэтому для объективной оценки пунктата костного мозга помимо подсчета миелограммы необходимо определение соответствующих костно-мозговых индексов.
Лейко-эритробластическое отношение
Следует отметить, что при гипоплазии и аплазии костного мозга, когда снижено количество клеток и лейкопоэза, и эритропоэза, лейко-эритробластическое отношение может быть в пределах нормы.
Индекс созревания нейтрофилов
Индекс созревания нейтрофилов (ИСН) выражает отношение молодых нейтрофильных гранулоцитов к зрелым и вычисляется по формуле:
(промиелоциты + миелоциты + метамиелоциты) / (палочкоядерные нейтрофилы + сегментоядерные нейтрофилы).
Снижение индекса созревания нейтрофилов может быть обусловлено значительной примесью периферической крови.
Индекс созревания эритрокариоцитов
(полихроматофильные + оксифильные нормобласты) / (эритробласты + пронормобласты + все нормобласты).
Снижение индекса созревания эритрокариоцитов наблюдается при железодефицитной и свинцовой анемиях, талассемии, гемоглобинопатиях и др. состояниях (когда идет нарушение синтеза гемоглобина).
Результаты исследования костного мозга оформляются в виде бланка. В зависимости от требований, предъявляемых лаборатории клиницистами, от «местных» лабораторных условий форма бланка и последовательность его заполнения может значительно варьировать в разных лабораториях, но обычно бланк состоит из двух частей: цифровой и описательной. Результаты подсчета миелограммы составляют цифровую часть бланка. Здесь помимо результатов исследования должны быть приведены нормальные величины всех показателей.
Клеточный состав костного мозга
Под цифровой частью бланка следует описательная часть с выводами. Прежде чем сделать окончательное заключение о состоянии костного мозга, необходимо соотнести полученные данные с нормой и с результатами исследования периферической крови. В ряде случаев необходимо решить, не разведен ли костный мозг кровью, так как по препарату, сильно разведенному периферической кровью, невозможно достоверно оценить костно-мозговое кроветворение. В таких случаях рекомендуется повторная пункция.
Признаки разведения костного мозга периферической кровью:
В описательной части обращают внимание на следующие моменты:
Затем необходимо охарактеризовать ростки кроветворения:
миелоидный росток:
эритроидный росток:
мегакариоцитарный росток:
При повышении содержания плазматических клеток в мазках следует указать
Описать нехарактерные для костного мозга клетки (в случае их присутствия):
При обнаружении в костно-мозговом пунктате неидентифицируемого вида клеток необходимо описать их по следующим признакам:
В конце описательной части, если позволяют данные, ставится предполагаемый лабораторный диагноз. Мазки костного мозга маркируют и хранят в архиве.
Литература:
Похожие статьи
Морфологическое исследование клеток костного мозга
Морфологическое исследование клеток костного мозга проводится в окрашенном препарате. Приготовление, фиксация и окраска мазков костного мозга осуществляются также, как и мазков периферической крови.
Раздел: Гемоцитология
Морфология клеток мегакариоцитарного ростка
Раздел: Гемоцитология
Морфология клеток ретикулярной стромы
Ретикулярные клетки довольно большого размера (18-30 мкм). Ядро круглое или овальное, структура ядра ажурная, иногда неравномерно-нитчатая и напоминает ядро моноцита, может содержать 1-2 ядрышка. Цитоплазма обильная, чаще всего с нерезко очерченными границами, нередко отростчатая, окрашивается в светло-голубой или серовато-голубой цвет, иногда содержит пылевидную азурофильную зернистость. В норме эти клетки в пунктате костного мозга содержатся в небольшом количестве.
Раздел: Гемоцитология
Подсчет миелокариоцитов
Раздел: Гемоцитология
Морфология клеток моноцитарного ростка
Раздел: Гемоцитология
Цитологическое исследование отпечатков трепанобиоптата костного мозга. Подсчет миелограммы. в Москве
Цитологическое исследование отпечатков трепанобиоптата костного мозга важно для понимания степени распространенности как онкогематологического заболевания, так и солидных опухолей, а также для первичной диагностики некоторых видов злокачественных новообразований.
Трепанобиоптат костного мозга получают путем забора биологического материала непосредственно из губчатых костей скелета.
Приём и исследование биоматериала
Когда нужно сдавать анализ Цитологическое исследование отпечатков трепанобиоптата костного мозга. Подсчет миелограммы.?
Подробное описание исследования
Красный костный мозг (миелоидная ткань) – основной орган кроветворения, расположен в губчатом веществе плоских костей (кости черепа, грудина, лопатки, позвонки, кости таза) и в эпифизах трубчатых костей. В нем находится множество стволовых кроветворных клеток, клетки-предшественники миело- и лимфопоэза, а также клетки крови на различных стадиях дифференцировки.
Основой диагностики заболеваний системы крови является морфологическое исследование пунктатов костного мозга, лимфатических узлов и мазков периферической крови. Данные цитологического исследования костного мозга чрезвычайно важны для выявления нарушений кроветворения.
Существуют два метода получения образцов костного мозга: аспирационная биопсия
и трепанобиопсия. При пункционном (аспирационном) анализе исследованию подвергается нативная клеточная взвесь (собственно костный мозг), при трепанобиопсии исследуется остеомедуллярный цилиндр (клеточная взвесь + микроокружение + кость). Метод трепанобиопсии костного мозга позволяет получить более полную информацию о состоянии костномозгового кроветворения.
Цитологическое исследование отпечатков трепанобиоптата костного мозга проводят с целью идентификации диагноза, для качественной и количественной оценки функции костномозгового кроветворения у пациентов с опухолевыми заболеваниями системы крови, анемиями и другими заболеваниями, а также с целью оценки проводимой терапии.
Трепанобиопсия костного мозга выполняется амбулаторно, под местной анестезией. Взятие биоматериала производится иглой Jamshidi в области задневерхней ости правой или левой подвздошной кости. После получения образца ткани на кожу накладывают асептическую повязку, пациент находится под наблюдением врачей 2-3 часа, после чего отправляется домой.
Отпечатки трепанобиоптата получают методом «прокатывания» столбика между двумя предметными стеклами. Препарат высушивается, маркируется и отправляется в лабораторию. В лаборатории отпечатки окрашиваются специальным красителем и анализируются под световым микроскопом.
В норме, состав костного мозга может подвергаться значительным изменениям в зависимости от возраста пациента, функционального состояния костного мозга, а также качества проводимой манипуляции.
Миелограмма – качественное и количественное исследование клеточного состава костного мозга. При подсчете миелограммы определяются клеточность состава, внешний вид клеток (моно/полиморфизм), количество мегакариоцитов, наличие скоплений опухолевых клеток.
При интерпретации миелограммы определяют процентное соотношение всех клеточных элементов отпечатка и морфологическое описание клеток в составе каждого из клеточных рядов.
Миелограмма представляет собой таблицу, в которой все клеточные элементы распределены в соответствии со своими клеточными линиями в зависимости от стадии их созревания
Цитологический анализ отпечатков трепанобиоптата и интерпретация миелограммы являются наиболее значимыми методами определения заболеваний системы кроветворения.
Что такое клеточность костного мозга
Цель исследования: оценка особенностей миелограммы из костного мозга трубчатых костей
Результаты исследования: Было исследовано 15 образцов костного мозга трубчатых костей, полученного при ампутации конечности. Высохшие на воздухе мазки фиксировались с использованием фиксатора Майн-Грюнвальда, далее фиксированные мазки окрашивались азур-эозином по Романовскому. Окрашенные препараты микроскопировали с иммерсией при увеличении х 1000 используя микроскоп Olympus CX 41 (окуляр на 10, объектив на 100). Следует отметить, что состояние костного мозга во всех случаях разное. Консистенция костного мозга варьирует от жидкого, как вода до густого типа желе, но это состояние не связано с клеточным составом и не влияет на результаты миелограмм. Также характерен цвет костного мозга трубчатых костей, чаще он желтоватый из-за жирового компонента, который является необходимым составляющим компонентом для жизнеобеспечения костного мозга. Утверждение, что костный мозг трубчатых костей перерождается в жировую ткань, является сомнительным, так как в процессе исследования костного мозга пациентов различного возраста, выявлено, что даже у 25-летнего больного, которому произведена ампутация конечности в связи с отморожением стопы, костный мозг имеет такой же процент жировой ткани, как и пожилые пациенты старше 70 лет. При исследовании костного мозга определяется неоднородность по наличию «островков кроветворения». В одних случаях их нет вообще, у других присутствуют единичные. Костный мозг трубчатых костей крайне редко бывает красноватого цвета, что позволяет предположить низкий уровень кроветворной функции. При подсчете миелограммы желтого костного мозга следует отметить следующее: недифференцированные бласты, миелобласты и промиелоциты в пределах от 0,1% до 1,4%. Содержание миелоцитов возрастает от 8,0% до 31,4%. Количество метамиелоцитов, палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов в пределах нормы. В целом клетки нейтрофильного ряда количественно составляют от 64,0% до 78,6%. Крайне низкое число клеток эозинофильного ряда от 0,1% до 3,0%. Содержание клеток эритроидного ряда незначительно снижено от 7,0% до 18,0%. Лейко-эритробластное соотношение имеет свои особенности и равно от 5:1 до 10:1. Индекс созревания эритробластов равен 1,0. Отмечается полное отсутствие тромбоцитов и мегакариоцитов. Во всех исследованных образцах (10) отмечалась нормальная клеточность костномозгового материала и в 2 случаях клеточность была снижена. Состав костного мозга полиморфный. Тип эритропоэза нормобластический. Гранулоцитарный росток в норме или расширен. Созревание нейтрофилов не нарушено. Эритроидный росток во всех случаях угнетен. Белый росток гиперплазирован.
Заключение: Полученные данные следует считать нормой для желтого костного мозга. Исследование особенностей желтого костного мозга, взятого из бедренной кости (в случае ампутации конечности) может быть использовано для более полного понимания процессов иммуногенеза, происходящих в организме. В последнее десятилетие резко повысился интерес к изучению стволовых клеток, что невозможно без тонкого изучения костного мозга, как красного, так и желтого в целом. Понимание процессов происходящих в микроокружении стволовых клеток, находящихся в костном мозге, даст нам возможность влиять на функциональное состояние этих клеток и управлять ими.
Данная работа выполнена при поддержке Красноярского краевого фонда поддержки научной и научно-технической деятельности.
Рецензенты:
Сухоруков А.М., д.м.н., проф. ФГБНУ «НИИ МПС» г. Красноярск;
Черданцев Д.В., д.м.н., проф., заведующий кафедрой и клиникой хирургических болезней им. проф. А.М. Дыхно с курсом эндоскопии и эндохирургии КрасГМУ, г. Красноярск.