что такое иммуноблот антинуклеарных антител это
Что такое иммуноблот антинуклеарных антител это
Получить результаты
Компания «Новые Медицинские Технологии»
Диагностика аутоиммунных заболеваний и синдромов
Показания к назначению анализа: диагностика и дифференциальная диагностика системных заболеваний соединительной ткани (особенно СКВ), аутоиммунного гепатита, вирусного гепатита с аутоиммунным компонентом (индуцированным вирусами или лечебными вмешательствами), первичного билиарного цирроза, рассеянного склероза; выявление аутоиммунного компонента при различных заболеваниях, в патогенезе которых может играть роль аутоагрессия. Материал для исследования: сыворотка крови.
Для определения антинуклеарных антител используется методика непрямой иммунофлюоресценции с использованием в качестве субстрата клеток культивируемой линии Нер-2.
Использование в качестве субстрата клеток злокачественной культивируемой линии благодаря их особенностям (высокое ядерно-цитоплазматическое соотношение, крупные размеры, наличие большого количества митозов) позволяет оценить различные типы свечения, характерные для присутствия в образце крови широкого спектра антител к различным антигенам, имеющих различные клинические ассоциации.
Следует иметь в виду, что часть из определяемых типов свечения является высокоспецифичной, четко ассоциирована с определенными заболеваниями и имеет вполне определенную диагностическую значимость, в особенности при выявлении в высоких титрах; однако некоторые антитела к различным антигенам могут давать сходные типы свечения, в таких случаях может требоваться дальнейшее обследование для уточнения конкретного антигена, к которому направлены аутоантитела. С другой стороны, определенный тип антител может встречаться при нескольких нозологических формах. Существуют также антитела (они встречаются редко), реагирующие исключительно с компонентами веретенного аппарата клеток; обычно они не связаны с аутоиммунными заболеваниями, и их обнаружение расценивается как ложнопозитивный, не имеющий клинических ассоциаций результат.
Все вышеперечисленные особенности обязательно отражаются в лабораторном заключении, где, помимо указания типа свечения и соответствующего ему наиболее вероятного типа антител, даются также рекомендации по трактовке результатов в смысле возможной ассоциации с конкретными нозоформами или синдромами, а также необходимые дополнительные лабораторные исследования.
ТРАКТОВКА РЕЗУЛЬТАТОВ.
У здоровых лиц моложе 60 лет следует ожидать отрицательных результатов на антитела к компонентам ядра и цитоплазмы; в низком титре (слабоположительный результат) эти антитела все же обнаруживаются у 2-3% (по некоторым данным, до 10%) практически здоровых людей, однако никогда нельзя предсказать, не разовьется ли у этих людей аутоиммунное заболевание в будущем (так, по данным некоторых авторов, антитела к ДНК начинают выявляться задолго до начала клинических проявлений СКВ, латентный период может продолжаться годами). После 60 лет частота слабоположительных результатов с возрастом постоянно растет. Клиническая значимость этих результатов остается неясной; как правило, они выявляются только в первичном (скрининговом) разведении 1:40. Исходя из этого, при выявлении положительного результата в скрининговом титре 1:40 всегда необходимо титрование, как минимум до диагностического титра 1:80. В любом случае представляется целесообразным последующее регулярное клинико-лабораторное наблюдение лиц, у которых выявлены ANA в низком титре.
ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА Положительный результат предполагает наличие определенных заболеваний (см. ниже), однако, как и результат любых лабораторных исследований, может нуждаться в подтверждении или уточнении с помощью других методов, а также в установлении клинико-лабораторных корреляций.
Надо иметь в виду, что различные лекарственные препараты могут вызывать образование аутоантител (гидралазин, прокаинамид, фенитоин, карбамазепин, изониазид, хлорпромазин, пеницилламин, леводофа, пенициллин, фенилбутазон, пероральные контрацептивы, хинидин). Наиболее частыми мишенями для этих ятрогенных аутоантител являются ядерные гистоны, что приводит к развитию гомогенного или гомогенного периферического типа свечения.
ЗАБОЛЕВАНИЯ, ПРИ КОТОРЫХ ЧАЩЕ ВСЕГО ВЫЯВЛЯЮТСЯ
АНА ИЛИ АНТИЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА
— системная красная волчанка (СКВ),
— ревматоидный артрит,
— синдром Шегрена,
— склеродермия,
— дерматомиозит,
— узелковый периартериит и др.;
Антинуклеарные антитела также могут выявляться при острых и хронических лейкозах, приобретенной гемолитической анемии, болезни Вальденстрема, малярии, хронической почечной недостаточности, тромбоцитопениях, лимфопролиферативных заболеваниях, миастении и тимомах.
Антитела при системной склеродермии, иммуноблот
Тест предназначен для определения антител к ядерным антигенам, используется в диагностике аутоиммунного заболевания – системной склеродермии.
Общая информация.
Аутоиммунные системные заболевания развиваются вследствие неадекватной реакции иммунной системы и продукции антител к собственным тканям и клеткам организма, поэтому характерно поражение многих органов и систем. При системной склеродермии преимущественно вырабатываются антитела к ядерным структурам клетки. Системная склеродермия проявляется поражением кожи и нарушением микроциркуляции органов и систем с дальнейшим развитием фиброза (замещения функциональной ткани соединительной тканью). Чаще поражаются легкие, пищевод, сердце и почки с развитием необратимых изменений при отсутствии лечения. Отдельно выделяют ограниченную форму системной склеродермии, когда поражается только кожа, что проявляется в виде утолщения кожи и подкожной клетчатки с нарушением подвижности в суставах.
Иммуноблот является подтверждающим тестом системной склеродермии при положительном результате антинуклеарного фактора на клеточной линии. Выявление антинуклеарных антител возможно при других аутоиммунных заболеваниях. Отрицательный результат не исключает системной склеродермии, при наличии симптомов, исследование должно быть продолжено.
С какой целью назначается исследование?
Как выполняется исследование?
ИФА, метод иммуноблоттинга
Как расшифровать результат иммуноблота?
Вариант нормы: антитела не обнаружены (отрицательный)
Формат выдачи результата – полуколичественный (в крестах) по каждому антигену отдельно. Результат может быть отрицательным (антитела не обнаружены), сомнительным (+), положительным (+++) и с выраженным количеством антител (++++).
Что означает выявление антител к каждому антигену (белку)?
Антитела (а/т) к белку топоизомеразе (Scl-70) – Выявляется при диффузных формах склеродермии, при поражении кожи и внутренних органов
А/т к к белкам центромер (CENТ A и CENT B) – являются главным диагностическим критерием CREST синдрома. Возможно их выявление при фиброзе легких и других аутоиммунных болезнях.
А/т к РНК полимеразам (RP11 и RP155) – показатель тяжелого течения с поражением внутренних органов
А/т к белкам фибриллярин и NOR90– достаточно точные маркеры системной склеродермии с поражением внутренних органов. Данные антитела обеспечивают ядрышковый тип свечения при исследовании антинуклеарного фактора.
А/т к Pm-Scl100, Pm-Scl75 – антитела, выявляемые при склеродермии и полимиозите (перекрестные). Определяются при поражении кожи, суставов, пищевода. Чаще встречаются в детском возрасте
А/т к Ku – перекрестные антитела при системной склеродермии и полимиозите, часто встречаются при поражении легких, других аутоиммунных процессах
А/т к PDGFR (тромбоцитарный фактор роста) – точный критерий системной склеродермии, встречается очень редко
А/т к Ro-52 (SSA-A 52 кДа) – неспецифичны, встречаются при многих системных заболеваниях
Возможно изолированное выявление антител или сочетанное (чаще). Результат интерпретируется лечащим врачом при анализе клиники, данных инструментальных и других лабораторных методов исследования.
Как правильно подготовиться к исследованию?
Сдаётся венозная кровь, допускается взятие биоматериала в течение дня через 3 часа после приёма пищи, воду пить в обычном режиме.
Антинуклеарные антитела
Что такое «Антинуклеарные антитела»?
Антинуклеарные антитела (АНА) — это группа аутоантител (антител к своим собственным тканям), которые реагируют с компонентами ядер клеток. Известно более 100 видов этих антиядерных антител, по структуре они относятся к белкам класса иммуноглобулинов: IgG, IgM, IgA.
Антитела вырабатываются к нуклеиновым кислотам и различным растворимым белковым компонентам ядра: гистонам, мембране ядра, сплайсосомам, ядрышкам, центромерам и рибонуклеопротеинам.
Заболевания, при которых иммунная система реагирует на свои белки, как на чужеродные, называются аутоиммунными патологиями. Тест на антиядерные антитела назначается для их диагностики. АНА находят более, чем у 90% больных системной красной волчанкой, рассеянным склерозом, аутоиммунным гепатитом, аутоиммунным панкреатитом, первичным билиарным циррозом и другими системными заболеваниями соединительной ткани.
Большинство антинуклеарных антител образуются в ответ на разрушение клеток, когда компоненты ядер становятся доступными для распознавания иммунной системой. В норме этого не происходит, так как иммунные клетки (макрофаги) уничтожают только разрушенные клетки и не передают информацию о них лимфоцитам.
Соединение «антитело и антиген» (компонент ядра) называется иммунным комплексом. Эти комплексы откладываются в стенках сосудов и тканях органов (кожа, почки, мозг, суставные поверхности и др.), что вызывает воспалительную реакцию и повреждение тканей.
В некоторых случаях антинуклеарные антитела образуются при разрушении клеток из-за другой болезни (опухоли, инфекции) или под действием ряда лекарственных препаратов. Но обычно количество таких антител низкое и они не долго циркулируют в крови.
Как подготовиться к анализу
Для исследования на АНА нужна венозная кровь.
Правила подготовки к исследованию:
Показания для назначения анализа
Рекомендовать анализ АНА врач может при:
Значение результатов анализа
Тест на антинуклеарные антитела проводится в виде:
При скрининговом исследовании положительный результат говорит о наличии у пациента какого-то заболевания соединительной ткани. Этот тест проводится при первичном обращении пациента. При отрицательном результате полностью исключить аутоиммунный процесс невозможно.
Иммуноблотинг показывает, какие виды антител преобладают, их сочетания. Такое исследование крови более сложное и дорогостоящее, но оно помогает точнее установить причину роста АНА в крови.
О чем говорит появление антинуклеарных антител в организме
Наличие антинуклеарных антител указывает на развитие в организме аутоиммунных патологий:
Менее выраженное повышение антинуклеарных антител характерно для:
Иммуноблот антинуклеарных антител
Описание
Синонимы (rus): Антинуклеарные антитела, специфичные АНА, антитела к экстрагируемым ядерным антигенам, антитела к экстрагируемым нуклеарным антигенам, анти-Sm, RNP, SS-A, SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, dsDNA, CENT-B, Jo-1, к гистонам, к нуклеосомам, Ribo P, AMA-M2
Синонимы (eng): ANA, ANA profile, antinuclear antibodies comprehensive profile, ANA-specific antibodies, anti-Sm, RNP, SS-A, SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, dsDNA, CENT-B, Jo-1, histone, nucleosome, Ribo P, AMA-M2
Биоматериал: Венозная кровь
Показатель(и): Антитела к антигенам: Sm, RNP/Sm, SS-A (60 kДа/52 кДа), SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENT-B, Jo-1, dsDNA/гистоны/, нуклеосомы, Ribo P, AMA-M2
Метод(и): Иммуноблот
Тип контейнера и особенности преаналитики: Биохимическая пробирка с активатором свертывания,6 мл (красная или коричневая крышечка)
Антинуклеарные антитела являются характерным маркером для диффузных заболеваний соединительной ткани, аутоиммунных заболеваний печени и некоторых других болезней. Это семейство антител, связывающее рибонуклеиновые кислоты, а также белки, с ними взаимодействующие. На данный момент известно около 200 аутоантител этого семейства, однако в клинической лабораторной диагностике оправдано определение лишь наиболее распространенных из них. Благодаря иммуноблоту антинуклеарных антител есть возможность одновременного исследования 15 антител данного семейства. Поскольку каждое антитело характерно для какого-либо одного или нескольких заболеваний, возникает возможность дифференциальной диагностики внутри группы аутоиммунных болезней. Кроме того, определённые антитела могут отвечать за развитие определенной клинической картины внутри единой нозологической единицы. Таким образом, обнаружение специфического антитела является предиктором развития определенной клинической картины у пациента. Условно можно сказать, что иммуноблот антинуклеарных антител является тестом второго уровня, и целесообразность его использования возникает при обнаружении антинуклеарных антител посредством проведения тестов на выявление антинуклеарного фактора и антител к экстрагируемому ядерному антигену (ЭНА). Если данные тесты обеспечивают высокую чувствительность для выявления антинуклеарных антител, то иммуноблот характеризуется высокой специфичностью для отдельных аутоиммунных заболеваний. Следует заметить, что на данный момент обнаружены не все типы антинуклеарных антител и, кроме того, не все известные типы используются в лабораторной диагностике. Таким образом, результат иммуноблота может быть отрицательным, и это не обязательно исключает диагноз аутоиммунный патологии.
Когда назначается
Тест показан для диагностики и дифференциальной диагностики следующих состояний: системная красная волчанка, подострая кожная волчанки и другие разновидности кожной волчанки, смешанное заболевание соединительной ткани, синдром Шегрена и ассоциированные заболевания, диффузная и локализованная склеродермия, CREST синдром, воспалительные миопатии (полимиозит и дерматомиозит), ювенильный хронический артрит, аутоиммунный гепатит, первичный билиарный цирроз и склерозирующий холангит.
Подготовка к анализу
Специальная подготовка не требуется. Рекомендуется забор крови не ранее чем через 4 часа после последнего приема пищи.Не курить в течение 30 минут до исследования.
Интерпретация
Тест является полуколичественным, что означает, что результат для каждого антигена представляется в «крестах», которые отражают концентрацию и аффинность антитела. Антитела к антигену Sm (Smith) являются высоко специфичными для системной красной волчанки. Анти-Sm направлены против 7 белков (B/B’, D1, D2, D3, E, F, G), составляющих ядро малого ядерного рибонуклеопротеина, и их определение входит в критерии СКВ с 1997 года. Антитела к SS-A (Ro52), интерферон-индуцируемому протеину, являются непецифичными и обнаруживаются при многих аутоиммунных заболеваниях. Так, антитела к данному антигену могут быть обнаружены при системной красной волчанке, её кожных формах, ревматоидном артрите, аутоиммунных заболеваниях печени, болезни Шегрена и так далее. Антитела к SS-A (Ro60) являются значительно более специфичными и отмечаются при классической системной красной волчанке, изолированно при кожной форме системной красной волчанке, а также являются основным показателем болезнь Шегрена. При обнаружении данного антитела у беременной, страдающей волчанкой, риск врожденной красной волчанки у её ребенка значительно повышается. Антитела к SS-B наиболее характерны для синдрома Шегрена (в этом случае типично обнаружение совместно с SS-A), а также для системной красной волчанки. PCNA-антитела обнаруживаются при системной красной волчанки с повышенным риском волчаночного нефрита. Антитела к рибосомам (Ribo P) обнаруживаются при системной красной волчанки в случае повышенного риска вовлечения центральной нервной системы. Антител к нуклеосомам наиболее значительно коррелирует с системной красной волчанкой с картиной волчаночного гломерулонефрита. Антитела к двуспиральной ДНК является маркером системной красной волчанки, внесённым в критерии ее диагностики с 1997 года. Антитела к snRNP/Sm являются неспецифическими и могут свидетельствовать как о смешанном заболевании соединительной ткани, так и о склеродермии или системной красной волчанке с низким риском почечного вовлечения. Антитела к гистонам характерны для лекарственной волчанки, склеродермии. Повышение титра антител к Scl-70 свидетельствует о системном склерозе с диффузным поражением кожи и внутренних органов. Выработка антител к PM-Scl достаточно специфично свидетельствует в пользу склеродермии, сопровождающейся полимиозитом. Обнаружение антител к антигену CENT-B свидетельствует о развитии CREST-синдрома, сопровождающегося склеродактилией, телеангиоэктазией, подкожными кальцинатами, синдромом Рейно и эзофагитом. Синтез антител к Jo-1 характерен для полимиозита в виде антисинтетазного синдрома. Антитела к AMA-M2 могут встречаться при первичном билиарном циррозе или синдроме Шегрена.
Что такое иммуноблот антинуклеарных антител это
Исследование, направленное на определение антинуклеарных антител, для диагностики и дифференциации склеродермии, формы и тяжести течения заболевания, поражения органов и систем.
Антинуклеарные антитела; иммуноблотинг; лайн-блоттинг; системная склеродермия.
Синонимы английские
Antinuclear antibodies (ANA); lain-blot; systemic sclerosis.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Общая информация об исследовании
В основе лабораторной серологической диагностики системной склеродермии лежит выявление антинуклеарных антител, играющих также большую роль в патогенезе заболевания. Данные антитела могут встречаться у 80-95 % больных склеродермией. Антинуклеарный фактор, определяемый методом непрямой иммунофлюресценции на клеточной линии HEp-2, выявляется у 90 % больных склеродермией. Метод иммуноблотинга является подтверждающим тестом, позволяющим выявлять антитела к более широкому спектру антигенов, характерных для данной патологии. К ним относятся антитела к Scl-70, CENT-A, CENT-B, RP11, RP155, Fibrillarin, NOR90, ThTo, PM-Scl 10075, Ku, PDGFR и Ro-52 антигенам.
Антитела к Scl-70 (топоизомеразе-1) направлены к негистоновому белку массой 70 кДа и могут быть обнаружены у 13-35 % больных ССД. Они встречаются чаще у больных с диффузной формой заболевания, свидетельствуют о тяжелом течении заболевания с вовлечением в патологический процесс легких, сосудов почек, сердца, мышц, суставов, а также коррелируют с активностью заболевания.
Антитела к центромерам (CENТ-A и CENТ-В) направлены к белкам-компонентам центромер и обнаруживаются у 20-30 % больных склеродермией. Они являются диагностическим маркером CREST-синдрома и чаще всего свидетельствуют о благоприятном течении заболевания, лимитированной форме склеродермии. Также следует отметить, что обнаружение данных антител может коррелировать с развитием легочного фиброза, поражения пищевода. Они могут быть обнаружены при других аутоиммунных заболеваниях: системной красной волчанке, ревматоидном артрите, аутоиммунном тиреоидите.
Антитела к РНК-полимеразам (RP 11, RP 155) являются высокоспецифичными для системной склеродермии, чаще встречаются у больных с диффузной формой заболевания (30-40 %). Они взаимосвязаны с тяжелым течением заболевания, развитием легочного фиброза, поражением почек, сердца.
Антитела к фибрилларину (fibrillarin) направлены против белковых компонентов U3 ядерного рибонуклеопротеинового комплекса и встречаются у 4 % больных склеродермией. Чаще они выявляются совместно с другими антителами: к центромерам, Scl-70 или РНК-полимеразам. Обнаружение данных антител у больных склеродермией может свидетельствовать о тяжелом течении заболевания с поражением внутренних органов. Они могут быть обнаружены при других аутоиммунных заболеваниях: системной красной волчанке, смешанном заболевании соединительной ткани, ревматоидном артрите.
Антитела к антигену NOR-90 встречаются редко, ассоциированы с лимитированной формой системной склеродермии.
Антитела к Th/To обнаруживаются в 2-5 % случаев заболевания, преимущественно при лимитированной форме склеродермии. Описывается взаимосвязь обнаружения данных антител с поражением легких, развитием легочной гипертензии, а также с поражением суставов.
Антитела к PM-Scl направлены к белкам массой 100 и 75 кДа, являются диагностическим лабораторным показателем перекрестного синдрома, для которого характерны клинические проявления склеродермии и полимиозита. Они могут быть обнаружены у 3 % больных ССД и у 8 % больных полимиозитом. Их выявление ассоциировано с поражением кожи, суставов, пищевода у больных системной склеродермией. Антитела к PM-Scl75 чаще обнаруживаются у лиц детского возраста.
Антитела к Ku антигену встречаются в 1-14 % случаев системной склеродермии. Они могут выявляться при перекрестном синдроме, сочетающем клинические проявления склеродермии и полимиозита/дерматомиозита. Описано наличие антител к Ku у больных системной красной волчанкой, синдромом Шегрена.
Встречаемость антител к рецептору фактора роста тромбоцитов (PDGFR) очень редка. Но данный показатель является высокоспецифичным для системной склеродермии и взаимосвязан с распространенным поражением кожи, легочным фиброзом.
Антитела к Ro-52 (Robert) направлены к антигену, представленному полипептидом, массой 52 кДа. Они встречаются при различных аутоиммунных заболеваниях: системной красной волчанке, дискоидной волчанке, синдроме Шегрена, системной склеродермии, ревматоидном артрите, смешанном заболевании соединительной ткани, аутоиммунных заболеваниях печени.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Компонент
Референсные
значения